沈阳药科大学学报
瀋暘藥科大學學報
침양약과대학학보
JOURNAL OF SHENYANG PHARMACEUTICAL UNIVERSIT
2005年
1期
62-66
,共5页
舒杨%何建勇%田威%张怡轩%张寒丽
舒楊%何建勇%田威%張怡軒%張寒麗
서양%하건용%전위%장이헌%장한려
棒状链霉菌%基因置换%高效液相色谱法%克拉维酸%头霉素C
棒狀鏈黴菌%基因置換%高效液相色譜法%剋拉維痠%頭黴素C
봉상련매균%기인치환%고효액상색보법%극랍유산%두매소C
目的提高棒状链霉菌的克拉维酸生产能力,去除副产物头霉素C.方法将安普霉素抗性基因片段插入到4.7 kb的lat-pcbAB基因片段中,采用接合转移方法对棒状链霉菌中头霉素C生物合成的关键基因lat基因进行了置换.结果与结论经PCR验证, 染色体上正常的lat-pcbAB基因被插入失活的基因所替代.对重组菌株的发酵产物进行HPLC检测,发现所有的重组菌株均不再合成头霉素C,并且重组菌株C3585-lat::apr、C251-lat::apr和C166-lat::apr 的克拉维酸产量较出发菌株分别提高了267.68%、43.69%和35.05%.结果表明基因插入失活是去除多余组分, 提高目标组分产量的可行途径.
目的提高棒狀鏈黴菌的剋拉維痠生產能力,去除副產物頭黴素C.方法將安普黴素抗性基因片段插入到4.7 kb的lat-pcbAB基因片段中,採用接閤轉移方法對棒狀鏈黴菌中頭黴素C生物閤成的關鍵基因lat基因進行瞭置換.結果與結論經PCR驗證, 染色體上正常的lat-pcbAB基因被插入失活的基因所替代.對重組菌株的髮酵產物進行HPLC檢測,髮現所有的重組菌株均不再閤成頭黴素C,併且重組菌株C3585-lat::apr、C251-lat::apr和C166-lat::apr 的剋拉維痠產量較齣髮菌株分彆提高瞭267.68%、43.69%和35.05%.結果錶明基因插入失活是去除多餘組分, 提高目標組分產量的可行途徑.
목적제고봉상련매균적극랍유산생산능력,거제부산물두매소C.방법장안보매소항성기인편단삽입도4.7 kb적lat-pcbAB기인편단중,채용접합전이방법대봉상련매균중두매소C생물합성적관건기인lat기인진행료치환.결과여결론경PCR험증, 염색체상정상적lat-pcbAB기인피삽입실활적기인소체대.대중조균주적발효산물진행HPLC검측,발현소유적중조균주균불재합성두매소C,병차중조균주C3585-lat::apr、C251-lat::apr화C166-lat::apr 적극랍유산산량교출발균주분별제고료267.68%、43.69%화35.05%.결과표명기인삽입실활시거제다여조분, 제고목표조분산량적가행도경.
