江苏农业学报
江囌農業學報
강소농업학보
JIANGSU JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2009年
1期
59-67
,共9页
段秀峰%林茂松%李红梅%王暄%刘维红
段秀峰%林茂鬆%李紅梅%王暄%劉維紅
단수봉%림무송%리홍매%왕훤%류유홍
斯氏线虫%大蜡螟%伯氏致病杆菌%血腔毒性%SDS-PAGE%口服毒性
斯氏線蟲%大蠟螟%伯氏緻病桿菌%血腔毒性%SDS-PAGE%口服毒性
사씨선충%대사명%백씨치병간균%혈강독성%SDS-PAGE%구복독성
对斯氏线虫(Steinernera feltiae)比利时品系的共生菌伯氏致病杆菌(Xenorhabdus bovienii BE)进行发酵培养,测定结果显示,该菌发酵液对供试昆虫大蜡螟老龄幼虫有很高的血腔毒性.对发酵液硫酸铵盐析和乙酸乙酯抽提物等衍生物进行测定,发现共生菌的杀虫物质主要为胞外和胞内蛋白成分,且胞内粗提蛋白活性明显高于胞外蛋白.对两种粗提蛋白进行Marker分子量范围为(1.43~9.72)×104 的SDS-PAGE分析,发现胞外粗提蛋白在此分子量范围内没有明显的条带,而胞内粗提蛋白则有较明显的5个条带.研究表明胞内粗提蛋白具有较高的热稳定性,测定的盐析最佳硫酸铵饱和度为80%,此粗提蛋白在24 h和48 h后对昆虫血腔毒性的LD50值分别为4.731 6 g/L和 1.571 5 g/L;其在5 d后对二龄幼虫的口服LD50为 253.757 9 μg/g.胞内粗提蛋白凝胶过滤后呈现4个峰值,分别对其进行SDS-PAGE分析,只有浓度较大的峰值1和4产生明显条带,分子量分别为6.64×104 和(2.01~2.90)×104 的2种复合蛋白;分别对它们进行血腔和口服毒性生物活性测定,发现分子量为(2.01~2.90)×104的2种复合蛋白杀虫活性高于分子量为6.64×104 蛋白的杀虫活性,其在24 h和48 h后对昆虫血腔毒性的LD50分别为 0.377 2 g/L和 0.123 8 g/L,其在5 d后对二龄幼虫的口服LD50为 93.002 1 μg/g.
對斯氏線蟲(Steinernera feltiae)比利時品繫的共生菌伯氏緻病桿菌(Xenorhabdus bovienii BE)進行髮酵培養,測定結果顯示,該菌髮酵液對供試昆蟲大蠟螟老齡幼蟲有很高的血腔毒性.對髮酵液硫痠銨鹽析和乙痠乙酯抽提物等衍生物進行測定,髮現共生菌的殺蟲物質主要為胞外和胞內蛋白成分,且胞內粗提蛋白活性明顯高于胞外蛋白.對兩種粗提蛋白進行Marker分子量範圍為(1.43~9.72)×104 的SDS-PAGE分析,髮現胞外粗提蛋白在此分子量範圍內沒有明顯的條帶,而胞內粗提蛋白則有較明顯的5箇條帶.研究錶明胞內粗提蛋白具有較高的熱穩定性,測定的鹽析最佳硫痠銨飽和度為80%,此粗提蛋白在24 h和48 h後對昆蟲血腔毒性的LD50值分彆為4.731 6 g/L和 1.571 5 g/L;其在5 d後對二齡幼蟲的口服LD50為 253.757 9 μg/g.胞內粗提蛋白凝膠過濾後呈現4箇峰值,分彆對其進行SDS-PAGE分析,隻有濃度較大的峰值1和4產生明顯條帶,分子量分彆為6.64×104 和(2.01~2.90)×104 的2種複閤蛋白;分彆對它們進行血腔和口服毒性生物活性測定,髮現分子量為(2.01~2.90)×104的2種複閤蛋白殺蟲活性高于分子量為6.64×104 蛋白的殺蟲活性,其在24 h和48 h後對昆蟲血腔毒性的LD50分彆為 0.377 2 g/L和 0.123 8 g/L,其在5 d後對二齡幼蟲的口服LD50為 93.002 1 μg/g.
대사씨선충(Steinernera feltiae)비리시품계적공생균백씨치병간균(Xenorhabdus bovienii BE)진행발효배양,측정결과현시,해균발효액대공시곤충대사명노령유충유흔고적혈강독성.대발효액류산안염석화을산을지추제물등연생물진행측정,발현공생균적살충물질주요위포외화포내단백성분,차포내조제단백활성명현고우포외단백.대량충조제단백진행Marker분자량범위위(1.43~9.72)×104 적SDS-PAGE분석,발현포외조제단백재차분자량범위내몰유명현적조대,이포내조제단백칙유교명현적5개조대.연구표명포내조제단백구유교고적열은정성,측정적염석최가류산안포화도위80%,차조제단백재24 h화48 h후대곤충혈강독성적LD50치분별위4.731 6 g/L화 1.571 5 g/L;기재5 d후대이령유충적구복LD50위 253.757 9 μg/g.포내조제단백응효과려후정현4개봉치,분별대기진행SDS-PAGE분석,지유농도교대적봉치1화4산생명현조대,분자량분별위6.64×104 화(2.01~2.90)×104 적2충복합단백;분별대타문진행혈강화구복독성생물활성측정,발현분자량위(2.01~2.90)×104적2충복합단백살충활성고우분자량위6.64×104 단백적살충활성,기재24 h화48 h후대곤충혈강독성적LD50분별위 0.377 2 g/L화 0.123 8 g/L,기재5 d후대이령유충적구복LD50위 93.002 1 μg/g.