CAJ | 학술논문

[目的]克隆金黄色葡萄球菌FnBP配体结合区基因,并构建原核表达载体,进行原核表达.[方法]设计引物,采用PCR方法扩增FnBP配体结合区基因,T-A克隆后,构建了克隆质粒pMD18-FnBP.用BamH I和EcoR I双酶切pMD18-FnBP和pET28a(+),将纯化的基因FnBP亚克隆至pET28a(+),构建重组表达质粒pET28a-FnBP,并将其转化至大肠杆菌感受态BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,并对表达产物进行分析. [结果]PCR扩增出1条约370 bp的目的片段,表达产物经SDS-PAGE分析,在30 kDa处出现了与目的蛋白一致的外源蛋白带,Western blot分析表明该蛋白具有金黄色葡萄球菌的抗原性.[结论]已成功构建了FnBP配体结合区基因,并在原核细胞中表达.
[목적]극륭금황색포도구균FnBP배체결합구기인,병구건원핵표체재체,진행원핵표체.[방법]설계인물,채용PCR방법확증FnBP배체결합구기인,T-A극륭후,구건료극륭질립pMD18-FnBP.용BamH I화EcoR I쌍매절pMD18-FnBP화pET28a(+),장순화적기인FnBP아극륭지pET28a(+),구건중조표체질립pET28a-FnBP,병장기전화지대장간균감수태BL21(DE3)중,IPTG유도표체,병대표체산물진행분석. [결과]PCR확증출1조약370 bp적목적편단,표체산물경SDS-PAGE분석,재30 kDa처출현료여목적단백일치적외원단백대,Western blot분석표명해단백구유금황색포도구균적항원성.[결론]이성공구건료FnBP배체결합구기인,병재원핵세포중표체.