现代检验医学杂志
現代檢驗醫學雜誌
현대검험의학잡지
JOURNAL OF MODERN LABORATORY MEDICINE
2009年
1期
7-10
,共4页
郭野%秦绪珍%崔巍%李龙芸
郭野%秦緒珍%崔巍%李龍蕓
곽야%진서진%최외%리룡예
中国健康人%血清%表皮生长因子受体%游离DNA%序列
中國健康人%血清%錶皮生長因子受體%遊離DNA%序列
중국건강인%혈청%표피생장인자수체%유리DNA%서렬
目的 分析中国健康人血清游离DNA中表皮生长因子受体(EGFR)外显子18～22基因序列是否存在突变,为监测EGFR酪氨酸激酶选择性抑制荆(EGFR TKIs)的临床疗效提供正常参考数据.方法 采用高灵敏度DNA提取方法结合高保真巢式PCR和基因测序技术对42例中国健康人外周血血清游离DNA中EGFR TKIs作用靶点所在结构域即EGFR外显子18～22的基因序列和氨基酸序列进行分析.结果 从外周血血清游离DNA中均扩增出EGFR外显予18～22的基因片段,片段大小(分别为400,374,404,408争419 bp)与预期设计片段完全相符.健康人外周血游离DNA中存在EGFR基因突变,突变频率出现最多的是EGFR外显子20.41名健康人样本中有7例样本出现1处相同位点的沉默点突变(4838499 G→A),其氨基酸序列(Glu)没有发生改变;EGFR外显子18也出现点突变,34名健康人样本中有1名健康者样本出现3处点突变,其中2处点突变(4830989 G→C;4831025 G→C)导致氨基酸序列发生改变(Glu→Gln;Ala-Pro),另外1处点突变(4831000 A→C)为沉默突变,其氨基酸序列(Thr)没有发生变化;EGFR外显子19、外显子21～22没有出现基因突变.结论 通过巢式PCR结合基因测序可以分析外周血游离DNA中EGFR基因序列,健康人外周血游离EGFR外显子18和20存在基因点突变,其中外显子18的点突变导致了氨基酸序列改变.
目的 分析中國健康人血清遊離DNA中錶皮生長因子受體(EGFR)外顯子18～22基因序列是否存在突變,為鑑測EGFR酪氨痠激酶選擇性抑製荊(EGFR TKIs)的臨床療效提供正常參攷數據.方法 採用高靈敏度DNA提取方法結閤高保真巢式PCR和基因測序技術對42例中國健康人外週血血清遊離DNA中EGFR TKIs作用靶點所在結構域即EGFR外顯子18～22的基因序列和氨基痠序列進行分析.結果 從外週血血清遊離DNA中均擴增齣EGFR外顯予18～22的基因片段,片段大小(分彆為400,374,404,408爭419 bp)與預期設計片段完全相符.健康人外週血遊離DNA中存在EGFR基因突變,突變頻率齣現最多的是EGFR外顯子20.41名健康人樣本中有7例樣本齣現1處相同位點的沉默點突變(4838499 G→A),其氨基痠序列(Glu)沒有髮生改變;EGFR外顯子18也齣現點突變,34名健康人樣本中有1名健康者樣本齣現3處點突變,其中2處點突變(4830989 G→C;4831025 G→C)導緻氨基痠序列髮生改變(Glu→Gln;Ala-Pro),另外1處點突變(4831000 A→C)為沉默突變,其氨基痠序列(Thr)沒有髮生變化;EGFR外顯子19、外顯子21～22沒有齣現基因突變.結論 通過巢式PCR結閤基因測序可以分析外週血遊離DNA中EGFR基因序列,健康人外週血遊離EGFR外顯子18和20存在基因點突變,其中外顯子18的點突變導緻瞭氨基痠序列改變.
목적 분석중국건강인혈청유리DNA중표피생장인자수체(EGFR)외현자18～22기인서렬시부존재돌변,위감측EGFR락안산격매선택성억제형(EGFR TKIs)적림상료효제공정상삼고수거.방법 채용고령민도DNA제취방법결합고보진소식PCR화기인측서기술대42례중국건강인외주혈혈청유리DNA중EGFR TKIs작용파점소재결구역즉EGFR외현자18～22적기인서렬화안기산서렬진행분석.결과 종외주혈혈청유리DNA중균확증출EGFR외현여18～22적기인편단,편단대소(분별위400,374,404,408쟁419 bp)여예기설계편단완전상부.건강인외주혈유리DNA중존재EGFR기인돌변,돌변빈솔출현최다적시EGFR외현자20.41명건강인양본중유7례양본출현1처상동위점적침묵점돌변(4838499 G→A),기안기산서렬(Glu)몰유발생개변;EGFR외현자18야출현점돌변,34명건강인양본중유1명건강자양본출현3처점돌변,기중2처점돌변(4830989 G→C;4831025 G→C)도치안기산서렬발생개변(Glu→Gln;Ala-Pro),령외1처점돌변(4831000 A→C)위침묵돌변,기안기산서렬(Thr)몰유발생변화;EGFR외현자19、외현자21～22몰유출현기인돌변.결론 통과소식PCR결합기인측서가이분석외주혈유리DNA중EGFR기인서렬,건강인외주혈유리EGFR외현자18화20존재기인점돌변,기중외현자18적점돌변도치료안기산서렬개변.
