植物病理学报
植物病理學報
식물병이학보
ACTA PHYTOPATHOLOGICA SINICA
2008年
5期
468-477
,共10页
李云%宋云枝%朱常香%温孚江
李雲%宋雲枝%硃常香%溫孚江
리운%송운지%주상향%온부강
马铃薯Y病毒坏死株系(PVYN)%RNA介导的病毒抗性%hpRNA%茎环比例
馬鈴藷Y病毒壞死株繫(PVYN)%RNA介導的病毒抗性%hpRNA%莖環比例
마령서Y병독배사주계(PVYN)%RNA개도적병독항성%hpRNA%경배비례
以马铃薯Y病毒坏死株系(PVYN)的外壳蛋白(coat protein,CP)基因3'端50 bp片段为hpRNA的茎,以pUCl9不同长度的序列为hpRNA的环,构建了茎环比例分别为4:1、2:1、1:1、1:2、1:4和1:8的植物表达载体.利用农杆菌介导法转化烟草品种NC89,获得了多种转基因植株.室内抗病性检测发现:不同茎环比例的hpRNA介导的病毒抗性效率不同;茎环比例为4:1、2:1和1:1时效率较高,抗性植株的比例达60%左右;随着环长度的逐渐增加,抗性植株的比例逐渐降低;当茎环比例为1:8时,抗性植株的比例仅为9.52%.Southern blot分析结果表明:外源基因已整合于烟草的基因组中,且转基因植株的抗病性与转基因的拷贝数之间无明显的相关性.Northern blot分析结果表明:目的片段转录产物的积累量与植株的抗病性呈负相关,证明所获得的抗病性是RNA介导的.
以馬鈴藷Y病毒壞死株繫(PVYN)的外殼蛋白(coat protein,CP)基因3'耑50 bp片段為hpRNA的莖,以pUCl9不同長度的序列為hpRNA的環,構建瞭莖環比例分彆為4:1、2:1、1:1、1:2、1:4和1:8的植物錶達載體.利用農桿菌介導法轉化煙草品種NC89,穫得瞭多種轉基因植株.室內抗病性檢測髮現:不同莖環比例的hpRNA介導的病毒抗性效率不同;莖環比例為4:1、2:1和1:1時效率較高,抗性植株的比例達60%左右;隨著環長度的逐漸增加,抗性植株的比例逐漸降低;噹莖環比例為1:8時,抗性植株的比例僅為9.52%.Southern blot分析結果錶明:外源基因已整閤于煙草的基因組中,且轉基因植株的抗病性與轉基因的拷貝數之間無明顯的相關性.Northern blot分析結果錶明:目的片段轉錄產物的積纍量與植株的抗病性呈負相關,證明所穫得的抗病性是RNA介導的.
이마령서Y병독배사주계(PVYN)적외각단백(coat protein,CP)기인3'단50 bp편단위hpRNA적경,이pUCl9불동장도적서렬위hpRNA적배,구건료경배비례분별위4:1、2:1、1:1、1:2、1:4화1:8적식물표체재체.이용농간균개도법전화연초품충NC89,획득료다충전기인식주.실내항병성검측발현:불동경배비례적hpRNA개도적병독항성효솔불동;경배비례위4:1、2:1화1:1시효솔교고,항성식주적비례체60%좌우;수착배장도적축점증가,항성식주적비례축점강저;당경배비례위1:8시,항성식주적비례부위9.52%.Southern blot분석결과표명:외원기인이정합우연초적기인조중,차전기인식주적항병성여전기인적고패수지간무명현적상관성.Northern blot분석결과표명:목적편단전록산물적적루량여식주적항병성정부상관,증명소획득적항병성시RNA개도적.
