华北农学报
華北農學報
화북농학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA
2008年
5期
6-12
,共7页
张艳%赵茂林%孙淼%徐粤宇
張豔%趙茂林%孫淼%徐粵宇
장염%조무림%손묘%서월우
多枝赖草%TAC克隆%二体(易位)附加系%抗逆性%双色荧光原位杂交
多枝賴草%TAC剋隆%二體(易位)附加繫%抗逆性%雙色熒光原位雜交
다지뢰초%TAC극륭%이체(역위)부가계%항역성%쌍색형광원위잡교
分别以耐黄矮病耐蚜虫小赖麦附加系Line24、耐盐耐旱小赖麦附加系Line15、耐盐小赖麦易位附加系Line14为材料,以它们各自所附加的含有相应抗逆基因的多枝赖草染色体(简称为抗逆染色体)的6个特定SSR分子标记为探针,通过两轮菌落杂交法筛选多枝赖草基因组可转化人工染色体(TAC)文库,最终得到经过验证的阳性克隆77个,它们分别对应于3个(易位)附加系中所附加抗逆染色体(臂)连锁群的6个特定SSR标记,每一标记所对应的TAC克隆数目变化在5~19个,平均约13个.进一步从来自Line24的抗逆染色体连锁群的同一个探针筛选到的阳性克隆中抽查2个TAC克隆15J18和09I02,通过双色荧光原位杂交技术(Double-color FISH)进行初步定位,直观地证明了文库筛选结果的准确性.为各条抗逆染色体的识别鉴定和相关抗逆基因的精细定位奠定了基础.
分彆以耐黃矮病耐蚜蟲小賴麥附加繫Line24、耐鹽耐旱小賴麥附加繫Line15、耐鹽小賴麥易位附加繫Line14為材料,以它們各自所附加的含有相應抗逆基因的多枝賴草染色體(簡稱為抗逆染色體)的6箇特定SSR分子標記為探針,通過兩輪菌落雜交法篩選多枝賴草基因組可轉化人工染色體(TAC)文庫,最終得到經過驗證的暘性剋隆77箇,它們分彆對應于3箇(易位)附加繫中所附加抗逆染色體(臂)連鎖群的6箇特定SSR標記,每一標記所對應的TAC剋隆數目變化在5~19箇,平均約13箇.進一步從來自Line24的抗逆染色體連鎖群的同一箇探針篩選到的暘性剋隆中抽查2箇TAC剋隆15J18和09I02,通過雙色熒光原位雜交技術(Double-color FISH)進行初步定位,直觀地證明瞭文庫篩選結果的準確性.為各條抗逆染色體的識彆鑒定和相關抗逆基因的精細定位奠定瞭基礎.
분별이내황왜병내아충소뢰맥부가계Line24、내염내한소뢰맥부가계Line15、내염소뢰맥역위부가계Line14위재료,이타문각자소부가적함유상응항역기인적다지뢰초염색체(간칭위항역염색체)적6개특정SSR분자표기위탐침,통과량륜균락잡교법사선다지뢰초기인조가전화인공염색체(TAC)문고,최종득도경과험증적양성극륭77개,타문분별대응우3개(역위)부가계중소부가항역염색체(비)련쇄군적6개특정SSR표기,매일표기소대응적TAC극륭수목변화재5~19개,평균약13개.진일보종래자Line24적항역염색체련쇄군적동일개탐침사선도적양성극륭중추사2개TAC극륭15J18화09I02,통과쌍색형광원위잡교기술(Double-color FISH)진행초보정위,직관지증명료문고사선결과적준학성.위각조항역염색체적식별감정화상관항역기인적정세정위전정료기출.