郑州大学学报（医学版）
鄭州大學學報（醫學版）
정주대학학보（의학판）
JOURNAL OF ZHENGZHOU UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2005年
3期
477-479
,共3页
间充质干细胞%体外培养%人骨髓%羟乙基呱嗪乙硫磺酸
間充質榦細胞%體外培養%人骨髓%羥乙基呱嗪乙硫磺痠
간충질간세포%체외배양%인골수%간을기고진을류광산
目的:探讨羟乙基呱嗪乙硫磺酸对人骨髓间充质干细胞(hMSC)纯化培养的影响.方法:采用全髓直接接种法分离培养13～18周胎龄水囊引产新鲜胎儿股骨骨髓,贴壁细胞达90%以上融合时消化传代.传代细胞分别接种于含100 ml/L胎牛血清的L-DMEM培养基(常规培养基)和加入15 mmol/L羟乙基呱嗪乙硫磺酸(Hepes)的常规培养基(改良培养基)中,观察细胞生长情况,用酸度计监测培养基pH值变化情况,流式细胞仪鉴定细胞纯度及CD抗原表达情况.并诱导改良培养基培养的hMSC向成骨细胞分化,酶细胞化学法和全自动生化仪检测碱性磷酸酶(ALP)活性,鉴定hMSC的成骨分化能力.结果:2种培养基培养的hMSC在细胞形态、生长特性、CD抗原表达等方面相似,但改良培养基由于pH值较恒定而能提高hMSC纯度及细胞增殖速度,且诱骨分化后可形成矿化结节,ALP染色阳性.结论:Hepes能提高全髓直接接种法培养的hMSC纯度及细胞增殖速度,简化骨髓细胞分离程序,减少细胞损伤及受污染机会,利于hMSC培养的推广应用.
目的:探討羥乙基呱嗪乙硫磺痠對人骨髓間充質榦細胞(hMSC)純化培養的影響.方法:採用全髓直接接種法分離培養13～18週胎齡水囊引產新鮮胎兒股骨骨髓,貼壁細胞達90%以上融閤時消化傳代.傳代細胞分彆接種于含100 ml/L胎牛血清的L-DMEM培養基(常規培養基)和加入15 mmol/L羥乙基呱嗪乙硫磺痠(Hepes)的常規培養基(改良培養基)中,觀察細胞生長情況,用痠度計鑑測培養基pH值變化情況,流式細胞儀鑒定細胞純度及CD抗原錶達情況.併誘導改良培養基培養的hMSC嚮成骨細胞分化,酶細胞化學法和全自動生化儀檢測堿性燐痠酶(ALP)活性,鑒定hMSC的成骨分化能力.結果:2種培養基培養的hMSC在細胞形態、生長特性、CD抗原錶達等方麵相似,但改良培養基由于pH值較恆定而能提高hMSC純度及細胞增殖速度,且誘骨分化後可形成礦化結節,ALP染色暘性.結論:Hepes能提高全髓直接接種法培養的hMSC純度及細胞增殖速度,簡化骨髓細胞分離程序,減少細胞損傷及受汙染機會,利于hMSC培養的推廣應用.
목적:탐토간을기고진을류광산대인골수간충질간세포(hMSC)순화배양적영향.방법:채용전수직접접충법분리배양13～18주태령수낭인산신선태인고골골수,첩벽세포체90%이상융합시소화전대.전대세포분별접충우함100 ml/L태우혈청적L-DMEM배양기(상규배양기)화가입15 mmol/L간을기고진을류광산(Hepes)적상규배양기(개량배양기)중,관찰세포생장정황,용산도계감측배양기pH치변화정황,류식세포의감정세포순도급CD항원표체정황.병유도개량배양기배양적hMSC향성골세포분화,매세포화학법화전자동생화의검측감성린산매(ALP)활성,감정hMSC적성골분화능력.결과:2충배양기배양적hMSC재세포형태、생장특성、CD항원표체등방면상사,단개량배양기유우pH치교항정이능제고hMSC순도급세포증식속도,차유골분화후가형성광화결절,ALP염색양성.결론:Hepes능제고전수직접접충법배양적hMSC순도급세포증식속도,간화골수세포분리정서,감소세포손상급수오염궤회,리우hMSC배양적추엄응용.
