寄生虫与医学昆虫学报
寄生蟲與醫學昆蟲學報
기생충여의학곤충학보
ACTA PARASITOLOGICA ET MEDICA ENTOMOLOGICA SINICA
2008年
3期
162-166
,共5页
粉尘螨%Der f18%诱导表达%纯化%免疫印迹
粉塵螨%Der f18%誘導錶達%純化%免疫印跡
분진만%Der f18%유도표체%순화%면역인적
通过对纯培养的粉尘螨提取总RNA,采用RT-PCR方法有效地扩增出Der f18片段,将Der f18连接到pET-24a表达载体上并转化到表达菌BL21(DE3)中,得到重组质粒pET-Der f18和重组工程菌.重组工程菌经IPTG诱导培养,高效表达出Der f18蛋白,SDS-PAGE结果显示表达产物约为52 kDa.表达产物经亲和层析纯化,用Western blot方法检测免疫学活性,结果表明目的蛋白具有良好的免疫原性.
通過對純培養的粉塵螨提取總RNA,採用RT-PCR方法有效地擴增齣Der f18片段,將Der f18連接到pET-24a錶達載體上併轉化到錶達菌BL21(DE3)中,得到重組質粒pET-Der f18和重組工程菌.重組工程菌經IPTG誘導培養,高效錶達齣Der f18蛋白,SDS-PAGE結果顯示錶達產物約為52 kDa.錶達產物經親和層析純化,用Western blot方法檢測免疫學活性,結果錶明目的蛋白具有良好的免疫原性.
통과대순배양적분진만제취총RNA,채용RT-PCR방법유효지확증출Der f18편단,장Der f18련접도pET-24a표체재체상병전화도표체균BL21(DE3)중,득도중조질립pET-Der f18화중조공정균.중조공정균경IPTG유도배양,고효표체출Der f18단백,SDS-PAGE결과현시표체산물약위52 kDa.표체산물경친화층석순화,용Western blot방법검측면역학활성,결과표명목적단백구유량호적면역원성.
