猪血凝性脑脊髓炎病毒S1蛋白基因在毕赤酵母中的表达
저혈응성뇌척수염병독S1단백기인재필적효모중적표체
Expression of S1 gene of hemagglutinating encephalomyelitis virus in Pichia pastoris yeast
  • 万方数据
    中国兽医学报 중국수의학보
    CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE
    2008年 1期 1-4 ,共4页

    陆慧君%贺文琦%高丰%常灵竹%赵魁%盖显英%王龙涛%宋德光

    륙혜군%하문기%고봉%상령죽%조괴%개현영%왕룡도%송덕광

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    应用特异性引物从猪血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)中扩增出S1蛋白基因,PCR产物纯化后克隆入pGEM-T载体中,得到重组质粒pTS1.用EcoRⅠ和NotⅠ双酶切pTS1,回收目的基因S1片段将其定向克隆到pPICZαA中,构建重组质粒pPICZαAS1.用BstXⅠ酶切pPICZαAS1使其线性化,并电转至感受态毕赤酵母细胞GS115.PCR法鉴定阳性重组子,用1%甲醇诱导表达后,进行SDS-PAGE及Western blot分析.结果显示,在酵母菌培养基上清中检测到相对分子质量为73000的重组蛋白,且该重组蛋白可与HEV多克隆抗体发生特异性血清学反应,表明HEV的S1蛋白片段在毕赤酵母中获得成功表达.
    응용특이성인물종저혈응성뇌척수염병독(HEV)중확증출S1단백기인,PCR산물순화후극륭입pGEM-T재체중,득도중조질립pTS1.용EcoRⅠ화NotⅠ쌍매절pTS1,회수목적기인S1편단장기정향극륭도pPICZαA중,구건중조질립pPICZαAS1.용BstXⅠ매절pPICZαAS1사기선성화,병전전지감수태필적효모세포GS115.PCR법감정양성중조자,용1%갑순유도표체후,진행SDS-PAGE급Western blot분석.결과현시,재효모균배양기상청중검측도상대분자질량위73000적중조단백,차해중조단백가여HEV다극륭항체발생특이성혈청학반응,표명HEV적S1단백편단재필적효모중획득성공표체.
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