安徽农业大学学报
安徽農業大學學報
안휘농업대학학보
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL UNIVERSITY
2008年
1期
26-29
,共4页
新城疫病毒%F基因%原核表达%免疫反应性
新城疫病毒%F基因%原覈錶達%免疫反應性
신성역병독%F기인%원핵표체%면역반응성
为研究NDV-F蛋白抗原表位在动物免疫应答中的作用特点,作者克隆和表达了NDV-F蛋白基因的部分片段,并检测其免疫反应性.首先根据F基因和载体pGEX-4T-1的多克隆位点自行设计了1对引物,以已克隆的NDV(F48E9株)的F基因为模板,通过PCR扩增获得长度为594 bp的片段.接着在电泳和酶切鉴定后将其定向插入pGEX-4T-1,构建重组质粒pGEX-4T-1-F594,并经PCR、双酶切及测序鉴定后,进一步将其转化到大肠杆菌BL21中.最后用IPTG诱导表达,提取物用SDS-PAGE和Western-blotting分析.结果表明,该基因片段表达的融合蛋白大小约为46 000,以包涵体形式存在,并具有良好的免疫反应性.
為研究NDV-F蛋白抗原錶位在動物免疫應答中的作用特點,作者剋隆和錶達瞭NDV-F蛋白基因的部分片段,併檢測其免疫反應性.首先根據F基因和載體pGEX-4T-1的多剋隆位點自行設計瞭1對引物,以已剋隆的NDV(F48E9株)的F基因為模闆,通過PCR擴增穫得長度為594 bp的片段.接著在電泳和酶切鑒定後將其定嚮插入pGEX-4T-1,構建重組質粒pGEX-4T-1-F594,併經PCR、雙酶切及測序鑒定後,進一步將其轉化到大腸桿菌BL21中.最後用IPTG誘導錶達,提取物用SDS-PAGE和Western-blotting分析.結果錶明,該基因片段錶達的融閤蛋白大小約為46 000,以包涵體形式存在,併具有良好的免疫反應性.
위연구NDV-F단백항원표위재동물면역응답중적작용특점,작자극륭화표체료NDV-F단백기인적부분편단,병검측기면역반응성.수선근거F기인화재체pGEX-4T-1적다극륭위점자행설계료1대인물,이이극륭적NDV(F48E9주)적F기인위모판,통과PCR확증획득장도위594 bp적편단.접착재전영화매절감정후장기정향삽입pGEX-4T-1,구건중조질립pGEX-4T-1-F594,병경PCR、쌍매절급측서감정후,진일보장기전화도대장간균BL21중.최후용IPTG유도표체,제취물용SDS-PAGE화Western-blotting분석.결과표명,해기인편단표체적융합단백대소약위46 000,이포함체형식존재,병구유량호적면역반응성.
