郑州大学学报（医学版）
鄭州大學學報（醫學版）
정주대학학보（의학판）
JOURNAL OF ZHENGZHOU UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2008年
1期
116-119
,共4页
莫耀南%赵贵森%郑海燕%刘良%杨渝珍
莫耀南%趙貴森%鄭海燕%劉良%楊渝珍
막요남%조귀삼%정해연%류량%양투진
DNA甲基化%链融解曲线法%亚硫酸氢盐%雄激素受体
DNA甲基化%鏈融解麯線法%亞硫痠氫鹽%雄激素受體
DNA갑기화%련융해곡선법%아류산경염%웅격소수체
目的:建立基于Rotor-Gene的链融解曲线法的甲基化标记筛选技术,分析各种影响因素,评估其实用性.方法:克隆Hela细胞雄激素受体基因外显子-1的Bisulfite-PCR产物,挑出经测序证实的可以代表不同甲基化程度的一组质粒,并以之为模板,在Rotor-Gene 3 000实时定量PCR仪进行扩增和链融解,分析融链温度、链融解曲线与甲基化程度、甲基化模式的相关性及各种影响因素.结果:基于Rotor-Gene 的链融解曲线法,不仅可以区分甲基化与非甲基化,而且能够鉴别片段内细微的甲基化差异;主要的影响因素有升温幅度、缓冲液离子强度、产物浓度等.结论:基于Rotor-Gene 的链融解曲线法,可以集扩增和链融解于一体,是一种经济简便的甲基化分析技术,可用于样品的甲基化筛选.
目的:建立基于Rotor-Gene的鏈融解麯線法的甲基化標記篩選技術,分析各種影響因素,評估其實用性.方法:剋隆Hela細胞雄激素受體基因外顯子-1的Bisulfite-PCR產物,挑齣經測序證實的可以代錶不同甲基化程度的一組質粒,併以之為模闆,在Rotor-Gene 3 000實時定量PCR儀進行擴增和鏈融解,分析融鏈溫度、鏈融解麯線與甲基化程度、甲基化模式的相關性及各種影響因素.結果:基于Rotor-Gene 的鏈融解麯線法,不僅可以區分甲基化與非甲基化,而且能夠鑒彆片段內細微的甲基化差異;主要的影響因素有升溫幅度、緩遲液離子彊度、產物濃度等.結論:基于Rotor-Gene 的鏈融解麯線法,可以集擴增和鏈融解于一體,是一種經濟簡便的甲基化分析技術,可用于樣品的甲基化篩選.
목적:건립기우Rotor-Gene적련융해곡선법적갑기화표기사선기술,분석각충영향인소,평고기실용성.방법:극륭Hela세포웅격소수체기인외현자-1적Bisulfite-PCR산물,도출경측서증실적가이대표불동갑기화정도적일조질립,병이지위모판,재Rotor-Gene 3 000실시정량PCR의진행확증화련융해,분석융련온도、련융해곡선여갑기화정도、갑기화모식적상관성급각충영향인소.결과:기우Rotor-Gene 적련융해곡선법,불부가이구분갑기화여비갑기화,이차능구감별편단내세미적갑기화차이;주요적영향인소유승온폭도、완충액리자강도、산물농도등.결론:기우Rotor-Gene 적련융해곡선법,가이집확증화련융해우일체,시일충경제간편적갑기화분석기술,가용우양품적갑기화사선.
