CAJ | 학술논문

目的克隆家蝇幼虫抗菌肽Attacin-His_6融合基因,构建真核表达载体并转染CHO细胞表达,为深入研究其生物学活性创造条件.方法以pUCm-T/Attacin载体为模板,用含6×His标签序列的下游引物克隆Attacin-His_6融合基因,并将其构建于pcDNA3.1(+)中,pcDNA3.1/Attacin-His_6重组质粒转染CHO细胞,Zeocin G418筛选阳性细胞株,RT-PCR检测重组质粒在CHO细胞的转录情况.结果成功扩增出Attacin-His_6融合基因,构建了pcDNA3.1/Attacin-His_6重组质粒并转染入CHO细胞中,RT-PCR从阳性克隆的CHO细胞中扩增出预期大小的目的片段,从转录水平证实CHO-Attacin-His_6重组细胞株表达了Attacin-His_6基因.结论抗菌肽Attacin基因哺乳动物型工程细胞表达系统的建立,为进一步制备其肽类抗生素奠定了基础.
목적 극륭가승유충항균태Attacin-His_6융합기인,구건진핵표체재체병전염CHO세포표체,위심입연구기생물학활성창조조건.방법 이pUCm-T/Attacin재체위모판,용함6×His표첨서렬적하유인물극륭Attacin-His_6융합기인,병장기구건우pcDNA3.1(+)중,pcDNA3.1/Attacin-His_6중조질립전염CHO세포,Zeocin G418사선양성세포주,RT-PCR검측중조질립재CHO세포적전록정황.결과 성공확증출Attacin-His_6융합기인,구건료pcDNA3.1/Attacin-His_6중조질립병전염입CHO세포중,RT-PCR종양성극륭적CHO세포중확증출예기대소적목적 편단,종전록수평증실CHO-Attacin-His_6중조세포주표체료Attacin-His_6기인.결론 항균태Attacin기인포유동물형공정세포표체계통적건립,위진일보제비기태류항생소전정료기출.