昆虫学报
昆蟲學報
곤충학보
ACTA ENTOMOLOGICA SINICA
2007年
10期
981-988
,共8页
孔玉萍%黄青春%刘曼慧%丰俊%刘扬
孔玉萍%黃青春%劉曼慧%豐俊%劉颺
공옥평%황청춘%류만혜%봉준%류양
粘虫%α-淀粉酶%参数优化%动力学常数
粘蟲%α-澱粉酶%參數優化%動力學常數
점충%α-정분매%삼수우화%동역학상수
针对粘虫Mythimna separata中肠α-淀粉酶筛选了11种不同参数组合的3,5-二硝基水杨酸活性测定方法,并对其中最适组合的各个参数进行了优化.结果表明:在离体测定条件下,粘虫中肠α-淀粉酶活性的最优化测定参数为0.03 mol/L磷酸盐缓冲液(pH 8.0,含有55 mmol/L NaCl)、温度45℃、吸收波长480 nm.Ca2+对α-淀粉酶活性具有抑制作用.该优化法能够显著降低粘虫、德国小蠊Blattella germanica、黄粉虫Tenebrio molitor、淡色库蚊Culex pipiens pallens和家蝇Musca domestica等昆虫α-淀粉酶的米氏常数Km值,且粘虫和德国小蠊α-淀粉酶的Vmax值增大,但黄粉虫、淡色库蚊和家蝇α-淀粉酶的Vmax值均明显减小.结果说明,在该优化体系下,粘虫α-淀粉酶与底物的亲和力增强,最大反应速度增大,测定酶活性的准确性和灵敏度显著提高;同时该优化体系也可作为测定德国小蠊α-淀粉酶活性的优化方法,但不适合作为黄粉虫、淡色库蚊和家蝇α-淀粉酶的最优化测定方法.
針對粘蟲Mythimna separata中腸α-澱粉酶篩選瞭11種不同參數組閤的3,5-二硝基水楊痠活性測定方法,併對其中最適組閤的各箇參數進行瞭優化.結果錶明:在離體測定條件下,粘蟲中腸α-澱粉酶活性的最優化測定參數為0.03 mol/L燐痠鹽緩遲液(pH 8.0,含有55 mmol/L NaCl)、溫度45℃、吸收波長480 nm.Ca2+對α-澱粉酶活性具有抑製作用.該優化法能夠顯著降低粘蟲、德國小蠊Blattella germanica、黃粉蟲Tenebrio molitor、淡色庫蚊Culex pipiens pallens和傢蠅Musca domestica等昆蟲α-澱粉酶的米氏常數Km值,且粘蟲和德國小蠊α-澱粉酶的Vmax值增大,但黃粉蟲、淡色庫蚊和傢蠅α-澱粉酶的Vmax值均明顯減小.結果說明,在該優化體繫下,粘蟲α-澱粉酶與底物的親和力增彊,最大反應速度增大,測定酶活性的準確性和靈敏度顯著提高;同時該優化體繫也可作為測定德國小蠊α-澱粉酶活性的優化方法,但不適閤作為黃粉蟲、淡色庫蚊和傢蠅α-澱粉酶的最優化測定方法.
침대점충Mythimna separata중장α-정분매사선료11충불동삼수조합적3,5-이초기수양산활성측정방법,병대기중최괄조합적각개삼수진행료우화.결과표명:재리체측정조건하,점충중장α-정분매활성적최우화측정삼수위0.03 mol/L린산염완충액(pH 8.0,함유55 mmol/L NaCl)、온도45℃、흡수파장480 nm.Ca2+대α-정분매활성구유억제작용.해우화법능구현저강저점충、덕국소렴Blattella germanica、황분충Tenebrio molitor、담색고문Culex pipiens pallens화가승Musca domestica등곤충α-정분매적미씨상수Km치,차점충화덕국소렴α-정분매적Vmax치증대,단황분충、담색고문화가승α-정분매적Vmax치균명현감소.결과설명,재해우화체계하,점충α-정분매여저물적친화력증강,최대반응속도증대,측정매활성적준학성화령민도현저제고;동시해우화체계야가작위측정덕국소렴α-정분매활성적우화방법,단불괄합작위황분충、담색고문화가승α-정분매적최우화측정방법.
