蛇志
蛇誌
사지
JOURNAL OF SNAKE
2007年
3期
175-179
,共5页
林文珍%舒雨雁%庄茂辛%林政炯%吴祥甫%周元聪
林文珍%舒雨雁%莊茂辛%林政炯%吳祥甫%週元聰
림문진%서우안%장무신%림정형%오상보%주원총
广西眼镜王蛇毒%酸性磷脂酶A2%表达
廣西眼鏡王蛇毒%痠性燐脂酶A2%錶達
엄서안경왕사독%산성린지매A2%표체
目的 构建广西眼镜王蛇毒酸性磷脂酶A2-1(APLA2-1)在不同载体的重组表达质粒,在E.coli中表达APLA2-1并比较不同表达系统对APLA2-1的表达效果.方法 将广西眼镜王蛇毒酸性磷脂酶A2-1(APLA2-1)基因克隆至表达载体pBLMVL2和pET28a(+),分别转化入大肠杆菌RR1和BL21,经过诱导表达,应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)及Western blot观察重组蛋白表达情况.结果 成功构建了重组质粒pBLMVL2-APLA2-1和pET28a-APLA2-1.pBLMVL2-APLA2-1在SDS-PAGE上没见明显表达带,在Western blot上可见一14 kD的表达带.pET28a-APLA2-1在SDS-PAGE上有一明显的18 kD表达条带,表达产物APLA2-1约占细菌总量30%,并以包涵体的形式存在.结论 APLA2-1可在大肠杆菌中表达,pET28a(+)对APLA2-1的表达效果优于pBLMVL2.
目的 構建廣西眼鏡王蛇毒痠性燐脂酶A2-1(APLA2-1)在不同載體的重組錶達質粒,在E.coli中錶達APLA2-1併比較不同錶達繫統對APLA2-1的錶達效果.方法 將廣西眼鏡王蛇毒痠性燐脂酶A2-1(APLA2-1)基因剋隆至錶達載體pBLMVL2和pET28a(+),分彆轉化入大腸桿菌RR1和BL21,經過誘導錶達,應用SDS-聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE)及Western blot觀察重組蛋白錶達情況.結果 成功構建瞭重組質粒pBLMVL2-APLA2-1和pET28a-APLA2-1.pBLMVL2-APLA2-1在SDS-PAGE上沒見明顯錶達帶,在Western blot上可見一14 kD的錶達帶.pET28a-APLA2-1在SDS-PAGE上有一明顯的18 kD錶達條帶,錶達產物APLA2-1約佔細菌總量30%,併以包涵體的形式存在.結論 APLA2-1可在大腸桿菌中錶達,pET28a(+)對APLA2-1的錶達效果優于pBLMVL2.
목적 구건엄서안경왕사독산성린지매A2-1(APLA2-1)재불동재체적중조표체질립,재E.coli중표체APLA2-1병비교불동표체계통대APLA2-1적표체효과.방법 장엄서안경왕사독산성린지매A2-1(APLA2-1)기인극륭지표체재체pBLMVL2화pET28a(+),분별전화입대장간균RR1화BL21,경과유도표체,응용SDS-취병희선알응효(SDS-PAGE)급Western blot관찰중조단백표체정황.결과 성공구건료중조질립pBLMVL2-APLA2-1화pET28a-APLA2-1.pBLMVL2-APLA2-1재SDS-PAGE상몰견명현표체대,재Western blot상가견일14 kD적표체대.pET28a-APLA2-1재SDS-PAGE상유일명현적18 kD표체조대,표체산물APLA2-1약점세균총량30%,병이포함체적형식존재.결론 APLA2-1가재대장간균중표체,pET28a(+)대APLA2-1적표체효과우우pBLMVL2.
