病毒学报
病毒學報
병독학보
CHINESE JOURNAL OF VIROLOGY
2007年
4期
276-281
,共6页
姚海兰%肖宗慧%任红雁%韩继生%刘哲伟
姚海蘭%肖宗慧%任紅雁%韓繼生%劉哲偉
요해란%초종혜%임홍안%한계생%류철위
RNAi%siRNA%柯萨奇B3病毒%抗病毒效应
RNAi%siRNA%柯薩奇B3病毒%抗病毒效應
RNAi%siRNA%가살기B3병독%항병독효응
为了研究短双链RNA(Small interfering RNA,siRNA)对柯萨奇B组3型病毒(CVB3)复制的影响及其作用特性,合成针对CVB3基因组2B区的siRNA-2B,脂质体法转染HeLa细胞后感染CVB3病毒,观测转染效率及存留时间、毒性作用、病毒致细胞病变效应、病毒滴度、病毒RNA含量、siRNA-2B对重组基因的特异性降解及培养上清有限稀释后再感染情况.结果发现siRNA-2B能高效转染入HeLa细胞并存留长达48h,高剂量的siRNA-2B对培养细胞无明显毒性,siRNA-2B能特异性针对2B区有效地降解病毒RNA,能明显抑制病毒RNA的复制.随着转染浓度的增加,siRNA-2B的抗病毒作用逐渐增强.siRNA-2B还能明显降低CVB3的再感染能力.这些结果提示,针对基因组2B区的siRNA-2B可以明显抑制CVB3基因复制,有效控制病毒再感染,并具有高效性、特异性和量效关系等特点.为siRNA可能成为预防和治疗CVB3感染的新途径奠定基础.
為瞭研究短雙鏈RNA(Small interfering RNA,siRNA)對柯薩奇B組3型病毒(CVB3)複製的影響及其作用特性,閤成針對CVB3基因組2B區的siRNA-2B,脂質體法轉染HeLa細胞後感染CVB3病毒,觀測轉染效率及存留時間、毒性作用、病毒緻細胞病變效應、病毒滴度、病毒RNA含量、siRNA-2B對重組基因的特異性降解及培養上清有限稀釋後再感染情況.結果髮現siRNA-2B能高效轉染入HeLa細胞併存留長達48h,高劑量的siRNA-2B對培養細胞無明顯毒性,siRNA-2B能特異性針對2B區有效地降解病毒RNA,能明顯抑製病毒RNA的複製.隨著轉染濃度的增加,siRNA-2B的抗病毒作用逐漸增彊.siRNA-2B還能明顯降低CVB3的再感染能力.這些結果提示,針對基因組2B區的siRNA-2B可以明顯抑製CVB3基因複製,有效控製病毒再感染,併具有高效性、特異性和量效關繫等特點.為siRNA可能成為預防和治療CVB3感染的新途徑奠定基礎.
위료연구단쌍련RNA(Small interfering RNA,siRNA)대가살기B조3형병독(CVB3)복제적영향급기작용특성,합성침대CVB3기인조2B구적siRNA-2B,지질체법전염HeLa세포후감염CVB3병독,관측전염효솔급존류시간、독성작용、병독치세포병변효응、병독적도、병독RNA함량、siRNA-2B대중조기인적특이성강해급배양상청유한희석후재감염정황.결과발현siRNA-2B능고효전염입HeLa세포병존류장체48h,고제량적siRNA-2B대배양세포무명현독성,siRNA-2B능특이성침대2B구유효지강해병독RNA,능명현억제병독RNA적복제.수착전염농도적증가,siRNA-2B적항병독작용축점증강.siRNA-2B환능명현강저CVB3적재감염능력.저사결과제시,침대기인조2B구적siRNA-2B가이명현억제CVB3기인복제,유효공제병독재감염,병구유고효성、특이성화량효관계등특점.위siRNA가능성위예방화치료CVB3감염적신도경전정기출.
