华南预防医学
華南預防醫學
화남예방의학
SOUTH CHINA JOURNAL OF PREVENTIVE MEDICINE
2007年
2期
18-21
,共4页
von Hippel-Lindau病%基因%细胞凋亡%Bax、Bcl-2蛋白
von Hippel-Lindau病%基因%細胞凋亡%Bax、Bcl-2蛋白
von Hippel-Lindau병%기인%세포조망%Bax、Bcl-2단백
目的 构建von Hippel-Lindau(VHL)基因的两种异构体的重组表达载体并研究异构体与细胞凋亡信号之间的关系. 方法 将VHL基因的两种异构体VHL19、VHL30分别克隆入真核表达载体pcDNA3.1中,测序鉴定.转染293细胞,通过蛋白印记分析细胞内两种异构体高效表达与凋亡信号Bax、Bcl-2之间的关系.结果 重组质粒经酶切获得与目的基因大小相当的条带(pVHL30约660 bp,pVHL19约500 bp),测序结果显示与目的基因完全相同.蛋白印记分析结果显示VHL19和VHL30在293细胞中获得表达,Bax和Bcl-2在空白对照、载体对照和pcDNA3.1-VHL19、pcDNA3.1-VHL30各组细胞之间的表达均没有观察到明显的差异.结论 成功构建VHL两种异构体VHL19、VHL30的高效表达质粒,并获得高效表达.当细胞内VHL19、VHL30高效表达时凋亡信号Bax、Bcl-2表达并没有明显变化.
目的 構建von Hippel-Lindau(VHL)基因的兩種異構體的重組錶達載體併研究異構體與細胞凋亡信號之間的關繫. 方法 將VHL基因的兩種異構體VHL19、VHL30分彆剋隆入真覈錶達載體pcDNA3.1中,測序鑒定.轉染293細胞,通過蛋白印記分析細胞內兩種異構體高效錶達與凋亡信號Bax、Bcl-2之間的關繫.結果 重組質粒經酶切穫得與目的基因大小相噹的條帶(pVHL30約660 bp,pVHL19約500 bp),測序結果顯示與目的基因完全相同.蛋白印記分析結果顯示VHL19和VHL30在293細胞中穫得錶達,Bax和Bcl-2在空白對照、載體對照和pcDNA3.1-VHL19、pcDNA3.1-VHL30各組細胞之間的錶達均沒有觀察到明顯的差異.結論 成功構建VHL兩種異構體VHL19、VHL30的高效錶達質粒,併穫得高效錶達.噹細胞內VHL19、VHL30高效錶達時凋亡信號Bax、Bcl-2錶達併沒有明顯變化.
목적 구건von Hippel-Lindau(VHL)기인적량충이구체적중조표체재체병연구이구체여세포조망신호지간적관계. 방법 장VHL기인적량충이구체VHL19、VHL30분별극륭입진핵표체재체pcDNA3.1중,측서감정.전염293세포,통과단백인기분석세포내량충이구체고효표체여조망신호Bax、Bcl-2지간적관계.결과 중조질립경매절획득여목적기인대소상당적조대(pVHL30약660 bp,pVHL19약500 bp),측서결과현시여목적기인완전상동.단백인기분석결과현시VHL19화VHL30재293세포중획득표체,Bax화Bcl-2재공백대조、재체대조화pcDNA3.1-VHL19、pcDNA3.1-VHL30각조세포지간적표체균몰유관찰도명현적차이.결론 성공구건VHL량충이구체VHL19、VHL30적고효표체질립,병획득고효표체.당세포내VHL19、VHL30고효표체시조망신호Bax、Bcl-2표체병몰유명현변화.
