中国肺癌杂志
中國肺癌雜誌
중국폐암잡지
CHINESE JOURNAL OF LUNG CANCER
2006年
1期
30-34
,共5页
马力%周清华%朱文%朱大兴%杨雪琴%王艳萍%陈小禾%张敏%高利伟%赵颖
馬力%週清華%硃文%硃大興%楊雪琴%王豔萍%陳小禾%張敏%高利偉%趙穎
마력%주청화%주문%주대흥%양설금%왕염평%진소화%장민%고리위%조영
人高转移大细胞肺癌细胞株L9981%nm23-H1基因%Wnt信号通路%GSK-3β%点突变
人高轉移大細胞肺癌細胞株L9981%nm23-H1基因%Wnt信號通路%GSK-3β%點突變
인고전이대세포폐암세포주L9981%nm23-H1기인%Wnt신호통로%GSK-3β%점돌변
背景与目的我们的前期研究结果表明nm23-H1基因的肺癌转移抑制作用可能与上调Wnt信号通路中关键激酶GSK-3β的活性、进而抑制Wnt信号通路相关.本研究的目的是探讨nm23-H1点突变对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中胞质和胞核的GSK-3β激酶活性的影响,为阐明nm23-H1基因调控肺癌转移相关信号传导通路的分子机制提供实验依据.方法将原代人低转移大细胞肺癌细胞株NL9980、原代人高转移大细胞肺癌细胞株L9981、空载体转染细胞株L9981-pEGFP、稳定转染nm23-H1基因的细胞株L9981-nm23-H1-pEGFP以及稳定转染在44、96、118、120号位点发生突变后的nm23-H1基因的转基因肺癌细胞株L9981-nm23-H1 S44A-pEGFP、L9981-nm23-H1P96S-pEGFP、L9981-nm23-H1H118F-pEGFP和L9981-nm23-H1S120G-pEGFP作为研究对象,应用免疫共沉淀同位素闪烁计数法测定上述肺癌细胞株胞质和胞核中的GSK-3β激酶活性.结果nm23-H1基因发生点突变后,所有转基因肺癌细胞株细胞胞质和胞核中的GSK-3β活性均较突变前有所下降.L9981-nm23-H1S44A-pEGFP、L9981-nm23-H1P96S-pEGFP、L9981-nm23-H1 H118F-pEGFP、L9981-nm23-H1 S120G-pEGFP分别与L9981-nm23-H1-pEGFP比较,胞质与胞核中GSK-3β激酶活性均存在显著性差异(P＜0.05),其中L9981-nm23-H1P96S-pEGFP与L9981-nm23-H1-pEGFP胞质中GSK-3β活性存在极显著差异(P＜0.01),L9981-nm23-H1S44A-pEGFP、L9981-nm23-H1P96S-pEGFP和L9981-nm23-H1 H118F-pEGFP与L9981-nm23-H1-pEGFP的胞核中GSK-3β活性存在极显著差异(P＜0.01).结论①nm23-H1基因突变能显著影响其对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981胞质和胞核中GSK-3β激酶活性的调控作用;②nm23-H1基因可能通过调控L9981中GSK-3β激酶活性来抑制L9981细胞株中Wnt信号传导.
揹景與目的我們的前期研究結果錶明nm23-H1基因的肺癌轉移抑製作用可能與上調Wnt信號通路中關鍵激酶GSK-3β的活性、進而抑製Wnt信號通路相關.本研究的目的是探討nm23-H1點突變對人高轉移大細胞肺癌細胞株L9981中胞質和胞覈的GSK-3β激酶活性的影響,為闡明nm23-H1基因調控肺癌轉移相關信號傳導通路的分子機製提供實驗依據.方法將原代人低轉移大細胞肺癌細胞株NL9980、原代人高轉移大細胞肺癌細胞株L9981、空載體轉染細胞株L9981-pEGFP、穩定轉染nm23-H1基因的細胞株L9981-nm23-H1-pEGFP以及穩定轉染在44、96、118、120號位點髮生突變後的nm23-H1基因的轉基因肺癌細胞株L9981-nm23-H1 S44A-pEGFP、L9981-nm23-H1P96S-pEGFP、L9981-nm23-H1H118F-pEGFP和L9981-nm23-H1S120G-pEGFP作為研究對象,應用免疫共沉澱同位素閃爍計數法測定上述肺癌細胞株胞質和胞覈中的GSK-3β激酶活性.結果nm23-H1基因髮生點突變後,所有轉基因肺癌細胞株細胞胞質和胞覈中的GSK-3β活性均較突變前有所下降.L9981-nm23-H1S44A-pEGFP、L9981-nm23-H1P96S-pEGFP、L9981-nm23-H1 H118F-pEGFP、L9981-nm23-H1 S120G-pEGFP分彆與L9981-nm23-H1-pEGFP比較,胞質與胞覈中GSK-3β激酶活性均存在顯著性差異(P＜0.05),其中L9981-nm23-H1P96S-pEGFP與L9981-nm23-H1-pEGFP胞質中GSK-3β活性存在極顯著差異(P＜0.01),L9981-nm23-H1S44A-pEGFP、L9981-nm23-H1P96S-pEGFP和L9981-nm23-H1 H118F-pEGFP與L9981-nm23-H1-pEGFP的胞覈中GSK-3β活性存在極顯著差異(P＜0.01).結論①nm23-H1基因突變能顯著影響其對人高轉移大細胞肺癌細胞株L9981胞質和胞覈中GSK-3β激酶活性的調控作用;②nm23-H1基因可能通過調控L9981中GSK-3β激酶活性來抑製L9981細胞株中Wnt信號傳導.
배경여목적아문적전기연구결과표명nm23-H1기인적폐암전이억제작용가능여상조Wnt신호통로중관건격매GSK-3β적활성、진이억제Wnt신호통로상관.본연구적목적시탐토nm23-H1점돌변대인고전이대세포폐암세포주L9981중포질화포핵적GSK-3β격매활성적영향,위천명nm23-H1기인조공폐암전이상관신호전도통로적분자궤제제공실험의거.방법장원대인저전이대세포폐암세포주NL9980、원대인고전이대세포폐암세포주L9981、공재체전염세포주L9981-pEGFP、은정전염nm23-H1기인적세포주L9981-nm23-H1-pEGFP이급은정전염재44、96、118、120호위점발생돌변후적nm23-H1기인적전기인폐암세포주L9981-nm23-H1 S44A-pEGFP、L9981-nm23-H1P96S-pEGFP、L9981-nm23-H1H118F-pEGFP화L9981-nm23-H1S120G-pEGFP작위연구대상,응용면역공침정동위소섬삭계수법측정상술폐암세포주포질화포핵중적GSK-3β격매활성.결과nm23-H1기인발생점돌변후,소유전기인폐암세포주세포포질화포핵중적GSK-3β활성균교돌변전유소하강.L9981-nm23-H1S44A-pEGFP、L9981-nm23-H1P96S-pEGFP、L9981-nm23-H1 H118F-pEGFP、L9981-nm23-H1 S120G-pEGFP분별여L9981-nm23-H1-pEGFP비교,포질여포핵중GSK-3β격매활성균존재현저성차이(P＜0.05),기중L9981-nm23-H1P96S-pEGFP여L9981-nm23-H1-pEGFP포질중GSK-3β활성존재겁현저차이(P＜0.01),L9981-nm23-H1S44A-pEGFP、L9981-nm23-H1P96S-pEGFP화L9981-nm23-H1 H118F-pEGFP여L9981-nm23-H1-pEGFP적포핵중GSK-3β활성존재겁현저차이(P＜0.01).결론①nm23-H1기인돌변능현저영향기대인고전이대세포폐암세포주L9981포질화포핵중GSK-3β격매활성적조공작용;②nm23-H1기인가능통과조공L9981중GSK-3β격매활성래억제L9981세포주중Wnt신호전도.
