中国病原生物学杂志
中國病原生物學雜誌
중국병원생물학잡지
JOURNAL OF PATHOGEN BIOLOGY
2007年
1期
14-16
,共3页
唐宇龙%杨华%刘湘新%秦莲花%柳彬%胡忠义
唐宇龍%楊華%劉湘新%秦蓮花%柳彬%鬍忠義
당우룡%양화%류상신%진연화%류빈%호충의
结核分枝杆菌%MPT53%克隆%表达
結覈分枝桿菌%MPT53%剋隆%錶達
결핵분지간균%MPT53%극륭%표체
目的 构建结核杆菌分泌蛋白MPT53原核表达载体并进行表达和纯化.方法 以结核分枝杆菌标准株H37Rv基因组DNA为模板扩增MPT53基因,产物经纯化回收后与载体pMD-T连接转化,酶切鉴定,克隆到pET32a原核表达载体,测序鉴定插入序列完全正确者转化大肠埃希菌BL21,诱导表达MPT53融合蛋白,亲和层析纯化后,进行SDS-PAGE电泳鉴定.结果 成功构建PET32a-MPT53重组质粒,转化BL21后经IPGT诱导成功表达分子质量单位为36 ku的MPT53蛋白,与理论值相符.结论 成功表达结核分枝杆菌MPT53蛋白,为其应用打下了基础.
目的 構建結覈桿菌分泌蛋白MPT53原覈錶達載體併進行錶達和純化.方法 以結覈分枝桿菌標準株H37Rv基因組DNA為模闆擴增MPT53基因,產物經純化迴收後與載體pMD-T連接轉化,酶切鑒定,剋隆到pET32a原覈錶達載體,測序鑒定插入序列完全正確者轉化大腸埃希菌BL21,誘導錶達MPT53融閤蛋白,親和層析純化後,進行SDS-PAGE電泳鑒定.結果 成功構建PET32a-MPT53重組質粒,轉化BL21後經IPGT誘導成功錶達分子質量單位為36 ku的MPT53蛋白,與理論值相符.結論 成功錶達結覈分枝桿菌MPT53蛋白,為其應用打下瞭基礎.
목적 구건결핵간균분비단백MPT53원핵표체재체병진행표체화순화.방법 이결핵분지간균표준주H37Rv기인조DNA위모판확증MPT53기인,산물경순화회수후여재체pMD-T련접전화,매절감정,극륭도pET32a원핵표체재체,측서감정삽입서렬완전정학자전화대장애희균BL21,유도표체MPT53융합단백,친화층석순화후,진행SDS-PAGE전영감정.결과 성공구건PET32a-MPT53중조질립,전화BL21후경IPGT유도성공표체분자질량단위위36 ku적MPT53단백,여이론치상부.결론 성공표체결핵분지간균MPT53단백,위기응용타하료기출.
