禽流感血凝素基因的原核表达及其在H9亚型诊断中的应用
금류감혈응소기인적원핵표체급기재H9아형진단중적응용
Expression of Hemagglutinin of Avian Influenza Virus (AIV) and its Application in Diagnosis of AIV H9 Subtype
  • 万方数据
    生物工程学报 생물공정학보
    CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
    2005年 2期 315-319 ,共5页

    张瑞华%金梅林%王贵华%喻正军%赵思婷%李红超%谭亚娣%陈焕春

    장서화%금매림%왕귀화%유정군%조사정%리홍초%담아제%진환춘

    禽流感病毒%血凝素基因%原核表达%ELISA 禽流感病毒%血凝素基因%原覈錶達%ELISA
    금류감병독%혈응소기인%원핵표체%ELISA
    根据H9N2亚型禽流感病毒血凝素基因序列设计并合成引物,从本室分离并保存的H9N2亚型禽流感病毒中扩增了预计约1683bp的血凝素基因,将此扩增产物克隆进pMD18-T载体,限制性酶切及序列测定后,进一步将其亚克隆到pGEX-KG中,与GST蛋白融合表达.SDS-PAGE和Western印迹表明缺失信号肽后的HA基因在大肠杆菌中获得了表达,表达产物具有免疫学活性,融合蛋白的分子量约为90kD,位于包涵体中.包涵体经变性、复性处理,利用复性产物作为抗原包被酶标板建立了检测H9亚型禽流感抗体ELISA方法.结果表明应用HA重组蛋白作为诊断H9亚型禽流感抗原具有特异性强、敏感性高、重复性好的特点,可用于H9亚型禽流感抗体的检测.
    근거H9N2아형금류감병독혈응소기인서렬설계병합성인물,종본실분리병보존적H9N2아형금류감병독중확증료예계약1683bp적혈응소기인,장차확증산물극륭진pMD18-T재체,한제성매절급서렬측정후,진일보장기아극륭도pGEX-KG중,여GST단백융합표체.SDS-PAGE화Western인적표명결실신호태후적HA기인재대장간균중획득료표체,표체산물구유면역학활성,융합단백적분자량약위90kD,위우포함체중.포함체경변성、복성처리,이용복성산물작위항원포피매표판건립료검측H9아형금류감항체ELISA방법.결과표명응용HA중조단백작위진단H9아형금류감항원구유특이성강、민감성고、중복성호적특점,가용우H9아형금류감항체적검측.
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