中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2003年
3期
283-289
,共7页
王子梅%钱锋%陆纲%孙佳%贾弘禔%倪菊华
王子梅%錢鋒%陸綱%孫佳%賈弘禔%倪菊華
왕자매%전봉%륙강%손가%가홍제%예국화
Ca2+振荡%nAChR基因%启动子%电刺激%骨骼肌细胞
Ca2+振盪%nAChR基因%啟動子%電刺激%骨骼肌細胞
Ca2+진탕%nAChR기인%계동자%전자격%골격기세포
利用不同电刺激条件模拟神经电活动,研究C2C12细胞(小鼠骨骼肌成肌细胞系)内Ca2+激活的不同形式及其对nAChR基因表达活性的影响.电刺激分化1 d的C2C12细胞,用共聚焦显微镜记录不同电刺激参数引起的细胞内Ca2+信号变化,共观察到3种不同形式的Ca2+信号,称之为整体Ca2+振荡、局部Ca2+振荡和局部Ca2+振荡诱发的整体Ca2+振荡.在此基础上,又构建nAChRγ亚基启动子萤光素酶报告基因质粒并转染C2C12细胞,进一步检测不同形式Ca2+引起细胞萤光素酶活性的变化,测定细胞内PKC活性的改变.不同Ca2+振荡引起细胞内PKC活性升高幅度不同;电刺激C2C12细胞可导致nAChRγ基因表达活性降低,3种Ca2+振荡对nAChRγ基因启动子活性的影响无显著差异.结果表明,电刺激可引起肌细胞产生不同形式Ca2+信号,但不同形式Ca2+信号对nAChRγ启动子活性的抑制无明显差异,提示Ca2+依赖的PKC途径可能不是nAChR基因表达下调的唯一途径.
利用不同電刺激條件模擬神經電活動,研究C2C12細胞(小鼠骨骼肌成肌細胞繫)內Ca2+激活的不同形式及其對nAChR基因錶達活性的影響.電刺激分化1 d的C2C12細胞,用共聚焦顯微鏡記錄不同電刺激參數引起的細胞內Ca2+信號變化,共觀察到3種不同形式的Ca2+信號,稱之為整體Ca2+振盪、跼部Ca2+振盪和跼部Ca2+振盪誘髮的整體Ca2+振盪.在此基礎上,又構建nAChRγ亞基啟動子螢光素酶報告基因質粒併轉染C2C12細胞,進一步檢測不同形式Ca2+引起細胞螢光素酶活性的變化,測定細胞內PKC活性的改變.不同Ca2+振盪引起細胞內PKC活性升高幅度不同;電刺激C2C12細胞可導緻nAChRγ基因錶達活性降低,3種Ca2+振盪對nAChRγ基因啟動子活性的影響無顯著差異.結果錶明,電刺激可引起肌細胞產生不同形式Ca2+信號,但不同形式Ca2+信號對nAChRγ啟動子活性的抑製無明顯差異,提示Ca2+依賴的PKC途徑可能不是nAChR基因錶達下調的唯一途徑.
이용불동전자격조건모의신경전활동,연구C2C12세포(소서골격기성기세포계)내Ca2+격활적불동형식급기대nAChR기인표체활성적영향.전자격분화1 d적C2C12세포,용공취초현미경기록불동전자격삼수인기적세포내Ca2+신호변화,공관찰도3충불동형식적Ca2+신호,칭지위정체Ca2+진탕、국부Ca2+진탕화국부Ca2+진탕유발적정체Ca2+진탕.재차기출상,우구건nAChRγ아기계동자형광소매보고기인질립병전염C2C12세포,진일보검측불동형식Ca2+인기세포형광소매활성적변화,측정세포내PKC활성적개변.불동Ca2+진탕인기세포내PKC활성승고폭도불동;전자격C2C12세포가도치nAChRγ기인표체활성강저,3충Ca2+진탕대nAChRγ기인계동자활성적영향무현저차이.결과표명,전자격가인기기세포산생불동형식Ca2+신호,단불동형식Ca2+신호대nAChRγ계동자활성적억제무명현차이,제시Ca2+의뢰적PKC도경가능불시nAChR기인표체하조적유일도경.
