新型噬菌粒展示载体pCANTAB5L的构建
신형서균립전시재체pCANTAB5L적구건
Construction of a novel phagemid pCANTAB5L
  • 万方数据
    第二军医大学学报 제이군의대학학보
    ACADEMIC JOURNAL OF SECOND MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
    2003年 3期 298-302 ,共5页

    沈毅%潘卫%易进华%徐容%陈秋莉%潘欣%冯春芝%邓松华%戚中田%刘彦君

    침의%반위%역진화%서용%진추리%반흔%풍춘지%산송화%척중전%류언군

    噬菌体展示%噬菌粒载体%多克隆位点%多肽接头 噬菌體展示%噬菌粒載體%多剋隆位點%多肽接頭
    서균체전시%서균립재체%다극륭위점%다태접두
    目的:将柔性多肽接头和多克隆位点引入噬菌粒载体pCANTAB5X中,构建适用于展示各种随机肽库、功能靶蛋白、功能靶蛋白变异体库和大分子量(>300个氨基酸)功能蛋白的新型噬菌粒展示载体.方法:应用5′端含XbaⅠ、StuⅠ、SalⅠ、KpnⅠ识别序列的引物,PCR扩增获得XbaⅠ-StuⅠ -SalⅠ-KpnⅠ-[G4S] 3-NotⅠ衔接片段,将该PCR产物克隆到pMD-18T 中 ,再将该片段插入pCANTAB5X中构建成新型噬菌粒展示载体pCANTAB5L.结果:限制性内切酶酶谱及DNA序列分析证明[G4S]3多肽接头和限制性内酶切位点Xba Ⅰ、StuⅠ、SalⅠ、KpnⅠ序列被引入到新构建的噬菌粒载体pCANTAB5L中.结论:成功构建了新型噬菌粒展示载体pCANT AB5L,并能有效展示功能靶蛋白、功能靶蛋白变异体库和大分子量功能蛋白.
    목적:장유성다태접두화다극륭위점인입서균립재체pCANTAB5X중,구건괄용우전시각충수궤태고、공능파단백、공능파단백변이체고화대분자량(>300개안기산)공능단백적신형서균립전시재체.방법:응용5′단함XbaⅠ、StuⅠ、SalⅠ、KpnⅠ식별서렬적인물,PCR확증획득XbaⅠ-StuⅠ -SalⅠ-KpnⅠ-[G4S] 3-NotⅠ함접편단,장해PCR산물극륭도pMD-18T 중 ,재장해편단삽입pCANTAB5X중구건성신형서균립전시재체pCANTAB5L.결과:한제성내절매매보급DNA서렬분석증명[G4S]3다태접두화한제성내매절위점Xba Ⅰ、StuⅠ、SalⅠ、KpnⅠ서렬피인입도신구건적서균립재체pCANTAB5L중.결론:성공구건료신형서균립전시재체pCANT AB5L,병능유효전시공능파단백、공능파단백변이체고화대분자량공능단백.
    원문보기 원문다운로드 사이트로이동
저자의 최근 논문