CAJ | 학술논문

目的：构建全基因HBV真核细胞表达载体，并对其在细胞内的复制、转录、翻译进行研究。方法：采用分子亚克隆技术，将长约3.2Kb的HBV全基因克隆到真核细胞表达载体pBK-CMV的EcoRI位点，构建的pKB-HBV经FUGENETM6导入人肝癌细胞系SMMC-7721细胞中。结果：经PCR、RT-PCR验证pBK-HBV能够在SMMC-7721细胞中有效复制和转录。固相放免法显示HBV转染细胞内的HBsAg、HBeAg的合成和分泌。免疫组化法证明，胞内浆型分布为主的HBcAg的表达。结论：HBV全基因真核细胞表达载体pBK-HBV能够在SMMC-7721细胞中有效复制、转录及表达。
목적：구건전기인HBV진핵세포표체재체，병대기재세포내적복제、전록、번역진행연구。방법：채용분자아극륭기술，장장약3.2Kb적HBV전기인극륭도진핵세포표체재체pBK-CMV적EcoRI위점，구건적pKB-HBV경FUGENETM6도입인간암세포계SMMC-7721세포중。결과：경PCR、RT-PCR험증pBK-HBV능구재SMMC-7721세포중유효복제화전록。고상방면법현시HBV전염세포내적HBsAg、HBeAg적합성화분비。면역조화법증명，포내장형분포위주적HBcAg적표체。결론：HBV전기인진핵세포표체재체pBK-HBV능구재SMMC-7721세포중유효복제、전록급표체。