CAJ | 학술논문

研究了E.coliBL21(DE3)及其磷酸转乙酰基酶(PTA)缺陷变株FR55发酵过程中菌体生长和有机酸产生情况,并以肿瘤坏死因子(TNF)为外源蛋白表达的模型考察了pta基因缺陷对外源蛋白表达的影响.在摇瓶培养条件下,pta变株TNF的表达水平比亲株提高了23%.在5L发酵罐中进行了补料分批培养试验,在不限制比生长速率的条件下pta变株能够以较长时间和较高比生长速率保持对数生长,最终达到32.5g(DCW)/L的菌密度,TNF的总表达量达2.8g/L;而在相同条件下,以BL21(DE3)为受体菌的对照组最高菌密度为19.5g(DCW)/L,TNF总表达量只有0.84g/L.表明pta变株对于提高工程菌外源蛋白的表达和实现高密度培养具有一定应用价值.分析了补料分批培养过程中发酵液有机酸组成和含量的动态变化情况,发现pta变株乙酸累积水平明显降低(为亲株乙酸累积水平的42%)的同时,其他几种有机酸(丙酮酸、乳酸、琥珀酸)的累积有显著增加的趋势,使发酵液中总有机酸浓度增加了123%,其中乳酸的累积是影响菌体进一步生长的主要因素.
연구료E.coliBL21(DE3)급기린산전을선기매(PTA)결함변주FR55발효과정중균체생장화유궤산산생정황,병이종류배사인자(TNF)위외원단백표체적모형고찰료pta기인결함대외원단백표체적영향.재요병배양조건하,pta변주TNF적표체수평비친주제고료23%.재5L발효관중진행료보료분비배양시험,재불한제비생장속솔적조건하pta변주능구이교장시간화교고비생장속솔보지대수생장,최종체도32.5g(DCW)/L적균밀도,TNF적총표체량체2.8g/L;이재상동조건하,이BL21(DE3)위수체균적대조조최고균밀도위19.5g(DCW)/L,TNF총표체량지유0.84g/L.표명pta변주대우제고공정균외원단백적표체화실현고밀도배양구유일정응용개치.분석료보료분비배양과정중발효액유궤산조성화함량적동태변화정황,발현pta변주을산루적수평명현강저(위친주을산루적수평적42%)적동시,기타궤충유궤산(병동산、유산、호박산)적루적유현저증가적추세,사발효액중총유궤산농도증가료123%,기중유산적루적시영향균체진일보생장적주요인소.