CAJ | 학술논문

[目的] 克隆在植物抗病虫过程中具有重要作用的核糖体失活蛋白新基因,为该类蛋白基因功能研究和有效利用创造条件.[方法] 通过分析多种不同来源的植物核糖体失活蛋白的氨基酸序列,据其保守区域设计1对植物通用简并引物P1和P2,对药用植物望江南基因组进行PCR扩增,获得一种新的RIP基因片段.通过RACE法,获得了其全长cDNA序列-CassiaI.[结果] CsssinI基因全长为882 bp,其推导的氨基酸序列与葫芦科两个代表核糖体失活蛋白β-luffin 和Trichosanthin(TCS)的相似性分别为58.2%和34.7%,与GenBank中其它核耱体失活蛋白的序列无显著相似性.多重序列比对发现:Cassin I有9个氨基酸残基与TCS的N-糖苷酶活性位点的残基完全相同,另外两个残基发生了变化.所有的活性位点都在P1/P2扩增区段内.[结论] 首次在望江南中克隆和报道一种新的核糖体失活蛋白基因,为进一步研究该基因的功能.并应用于作物转基因抗病虫害育种研究奠定了基础.
[목적] 극륭재식물항병충과정중구유중요작용적핵당체실활단백신기인,위해류단백기인공능연구화유효이용창조조건.[방법] 통과분석다충불동래원적식물핵당체실활단백적안기산서렬,거기보수구역설계1대식물통용간병인물P1화P2,대약용식물망강남기인조진행PCR확증,획득일충신적RIP기인편단.통과RACE법,획득료기전장cDNA서렬-CassiaI.[결과] CsssinI기인전장위882 bp,기추도적안기산서렬여호호과량개대표핵당체실활단백β-luffin 화Trichosanthin(TCS)적상사성분별위58.2%화34.7%,여GenBank중기타핵마체실활단백적서렬무현저상사성.다중서렬비대발현:Cassin I유9개안기산잔기여TCS적N-당감매활성위점 적잔기완전상동,령외량개잔기발생료변화.소유적활성위점도재P1/P2확증구단내.[결론] 수차재망강남중극륭화보도일충신적핵당체실활단백기인,위진일보연구해기인적공능.병응용우작물전기인항병충해육충연구전정료기출.