CAJ | 학술논문

选择没有自然血凝性的三个标准IBV毒株(M41、Gray、T株)和四个由西北农大禽病研究室分离的陕西省地方株[X、Fu、W和H株(有自然血凝性)],在非免疫鸡胚上增殖后,用蔗糖透析法浓缩10倍,再分别采用三种方法处理,制备IBV-HA抗原:1)用浓缩4倍的兔A型魏氏梭菌培养液滤液(R.W.F.C4)处理IBV;2)用2.5U/mlI型磷酸酯酶C(PLC1)处理IBV;3)用1%胰酶处理IBV.结果显示,除T株仍不具有血凝性外,其余毒株都有了较高的血凝价.IBVM41株、X株HA效价株高达28,Fu、Gray、W、H株的HA效价也达27-29.但是,用方法3)来制备HA抗原没有任何实用价值.因为1%胰酶本身具有非常强的非特异性凝集作用,非特异性HA价高达8log2.而采用R.W.F.C4和2.5U/ml PLC1处理IBV浓缩毒制得的IBV-HA抗原,除T株外,均能凝集鸡红细胞,且该凝集作用可被特异的IBV抗血清所抑制,而不能被ND、EDS-76、IBD等其它鸡病阳性血清所抑制,说明该抗原具有较强的特异性.本试验还对影响IBV血凝试验和血凝抑制试验的各种因素进行了研究.比较了用R.W.F.C4和用2.5U/mlPLC1处理IBV制备HA抗原血凝价,结果显示二者的血凝价是一致的,所以完全可以用廉价的兔A型魏氏梭菌培养液代替昂贵的PLC1作为抗原处理液.本试验还采用IBV-M41株和陕西省地方肾型株X株制备IBV-HA双价抗原,结果表明,用上述IBV-HA二价抗原所测出的各毒株抗血清的HA效价和用各毒株所制得的IBV-HA单价抗原所测出的相应毒株抗血清的HI效价差异不显著,说明IBV二价HA抗原的抗原交叉性广泛,可用于IB的免疫监测和诊断.本试验还将在同一条件下获得的免疫鸡血清分别采用HI和CEKC-SN二种方法所测得的抗体效价进行了比较,结果经统计学分析表明:HI效价与CEKC-SN效价呈正相关,相关系数为0.6585,且HI法比ECKC-SN法省时、省力.
선택몰유자연혈응성적삼개표준IBV독주(M41、Gray、T주)화사개유서북농대금병연구실분리적합서성지방주[X、Fu、W화H주(유자연혈응성)],재비면역계배상증식후,용자당투석법농축10배,재분별채용삼충방법처리,제비IBV-HA항원:1)용농축4배적토A형위씨사균배양액려액(R.W.F.C4)처리IBV;2)용2.5U/mlI형린산지매C(PLC1)처리IBV;3)용1%이매처리IBV.결과현시,제T주잉불구유혈응성외,기여독주도유료교고적혈응개.IBVM41주、X주HA효개주고체28,Fu、Gray、W、H주적HA효개야체27-29.단시,용방법3)래제비HA항원몰유임하실용개치.인위1%이매본신구유비상강적비특이성응집작용,비특이성HA개고체8log2.이채용R.W.F.C4화2.5U/ml PLC1처리IBV농축독제득적IBV-HA항원,제T주외,균능응집계홍세포,차해응집작용가피특이적IBV항혈청소억제,이불능피ND、EDS-76、IBD등기타계병양성혈청소억제,설명해항원구유교강적특이성.본시험환대영향IBV혈응시험화혈응억제시험적각충인소진행료연구.비교료용R.W.F.C4화용2.5U/mlPLC1처리IBV제비HA항원혈응개,결과현시이자적혈응개시일치적,소이완전가이용렴개적토A형위씨사균배양액대체앙귀적PLC1작위항원처리액.본시험환채용IBV-M41주화합서성지방신형주X주제비IBV-HA쌍개항원,결과표명,용상술IBV-HA이개항원소측출적각독주항혈청적HA효개화용각독주소제득적IBV-HA단개항원소측출적상응독주항혈청적HI효개차이불현저,설명IBV이개HA항원적항원교차성엄범,가용우IB적면역감측화진단.본시험환장재동일조건하획득적면역계혈청분별채용HI화CEKC-SN이충방법소측득적항체효개진행료비교,결과경통계학분석표명:HI효개여CEKC-SN효개정정상관,상관계수위0.6585,차HI법비ECKC-SN법성시、성력.