农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
1999年
1期
29-36
,共8页
王新望%赖菁茹%姚大年%孙辉%刘广田
王新望%賴菁茹%姚大年%孫輝%劉廣田
왕신망%뢰정여%요대년%손휘%류엄전
中国春小麦%Ph1基因%ph1b突变体%RAPD%标记辅助选择
中國春小麥%Ph1基因%ph1b突變體%RAPD%標記輔助選擇
중국춘소맥%Ph1기인%ph1b돌변체%RAPD%표기보조선택
用260个10 bp随机引物对中国春(CS)、ph1b突变体及其F2分离群体基因组DNA进行RAPD分析, 筛选出两个特异的RAPD标记OPR7936和OPR17524.经Southern分析, 并结合减数分裂MI染色体配对分析, 认为这两个RAPD标记位于5BL染色体ph1b基因缺失区中, 可以作为ph1b基因的分子标记.经过连锁分析, 测得OPR7936与Ph1基因之间的距离为11.4 cM, OPR17524与Ph1基因之间的距离为5.0 cM, 均位于Ph1基因的远着丝粒端. 测序后, 经同源性比较发现这两个DNA序列可能是ph1b基因区中的两个不同位点上的新序列, 并有可能成为Ph1基因区图谱新的探针.根据这两个RAPD克隆片段的两端序列, 分别设计出一对24 bp的SCAR引物,可特异扩增Ph1基因的一条带(SCR7823和SCR17403), 而ph1b基因缺少各自的特征带, 其扩增产物无需电泳分离, 只需在反应管中加入溴化乙锭, 紫外灯下直接根据荧光反应即可鉴定出ph1b基因型, 为今后ph1b基因的转育进行标记辅助选择又提供了两个易于操作、有效的分子标记.
用260箇10 bp隨機引物對中國春(CS)、ph1b突變體及其F2分離群體基因組DNA進行RAPD分析, 篩選齣兩箇特異的RAPD標記OPR7936和OPR17524.經Southern分析, 併結閤減數分裂MI染色體配對分析, 認為這兩箇RAPD標記位于5BL染色體ph1b基因缺失區中, 可以作為ph1b基因的分子標記.經過連鎖分析, 測得OPR7936與Ph1基因之間的距離為11.4 cM, OPR17524與Ph1基因之間的距離為5.0 cM, 均位于Ph1基因的遠著絲粒耑. 測序後, 經同源性比較髮現這兩箇DNA序列可能是ph1b基因區中的兩箇不同位點上的新序列, 併有可能成為Ph1基因區圖譜新的探針.根據這兩箇RAPD剋隆片段的兩耑序列, 分彆設計齣一對24 bp的SCAR引物,可特異擴增Ph1基因的一條帶(SCR7823和SCR17403), 而ph1b基因缺少各自的特徵帶, 其擴增產物無需電泳分離, 隻需在反應管中加入溴化乙錠, 紫外燈下直接根據熒光反應即可鑒定齣ph1b基因型, 為今後ph1b基因的轉育進行標記輔助選擇又提供瞭兩箇易于操作、有效的分子標記.
용260개10 bp수궤인물대중국춘(CS)、ph1b돌변체급기F2분리군체기인조DNA진행RAPD분석, 사선출량개특이적RAPD표기OPR7936화OPR17524.경Southern분석, 병결합감수분렬MI염색체배대분석, 인위저량개RAPD표기위우5BL염색체ph1b기인결실구중, 가이작위ph1b기인적분자표기.경과련쇄분석, 측득OPR7936여Ph1기인지간적거리위11.4 cM, OPR17524여Ph1기인지간적거리위5.0 cM, 균위우Ph1기인적원착사립단. 측서후, 경동원성비교발현저량개DNA서렬가능시ph1b기인구중적량개불동위점상적신서렬, 병유가능성위Ph1기인구도보신적탐침.근거저량개RAPD극륭편단적량단서렬, 분별설계출일대24 bp적SCAR인물,가특이확증Ph1기인적일조대(SCR7823화SCR17403), 이ph1b기인결소각자적특정대, 기확증산물무수전영분리, 지수재반응관중가입추화을정, 자외등하직접근거형광반응즉가감정출ph1b기인형, 위금후ph1b기인적전육진행표기보조선택우제공료량개역우조작、유효적분자표기.
