病毒学报
病毒學報
병독학보
CHINESE JOURNAL OF VIROLOGY
1999年
4期
323-329
,共7页
彭天庆%杨英珍%李光地%孔玉英
彭天慶%楊英珍%李光地%孔玉英
팽천경%양영진%리광지%공옥영
柯萨奇B3病毒(CVB3)%衣壳蛋白%重组痘苗病毒
柯薩奇B3病毒(CVB3)%衣殼蛋白%重組痘苗病毒
가살기B3병독(CVB3)%의각단백%중조두묘병독
将编码柯萨奇B3病毒(CVB3)衣壳蛋白VP1和VP2的基因,分别克隆到具有7.5k启动子的痘苗病毒表达载体pGJP5上;将CVB3衣壳蛋白全基因克隆到具有T7启动子的痘苗表达载体pTM1上,并筛选到相应的重组痘苗病毒VVP1、VVP2和VVP/4/2/3/1.VVP1和VVP2稳定表达产物为CVB3衣壳蛋白VP1和VP2,而VVP/4/2/3/1的产物VP4/2/3/1为一无分泌性的多聚蛋白,且这三种表达产物均属无分泌性蛋白.为了表达成熟的CVB3衣壳蛋白,将去除5′端非编码区的CVB3全基因克隆到具有T7启动子的痘苗表达载体pTM1上,利用重组痘苗病毒VT7所提供的T7RNA聚合酶,在哺乳动物细胞中进行了暂时表达研究.Western blot分析提示,VP1、VP2和VP3蛋白得到成熟表达,且发现表达产物具有分泌性.本研究将为今后研究CVB免疫性打下基础.
將編碼柯薩奇B3病毒(CVB3)衣殼蛋白VP1和VP2的基因,分彆剋隆到具有7.5k啟動子的痘苗病毒錶達載體pGJP5上;將CVB3衣殼蛋白全基因剋隆到具有T7啟動子的痘苗錶達載體pTM1上,併篩選到相應的重組痘苗病毒VVP1、VVP2和VVP/4/2/3/1.VVP1和VVP2穩定錶達產物為CVB3衣殼蛋白VP1和VP2,而VVP/4/2/3/1的產物VP4/2/3/1為一無分泌性的多聚蛋白,且這三種錶達產物均屬無分泌性蛋白.為瞭錶達成熟的CVB3衣殼蛋白,將去除5′耑非編碼區的CVB3全基因剋隆到具有T7啟動子的痘苗錶達載體pTM1上,利用重組痘苗病毒VT7所提供的T7RNA聚閤酶,在哺乳動物細胞中進行瞭暫時錶達研究.Western blot分析提示,VP1、VP2和VP3蛋白得到成熟錶達,且髮現錶達產物具有分泌性.本研究將為今後研究CVB免疫性打下基礎.
장편마가살기B3병독(CVB3)의각단백VP1화VP2적기인,분별극륭도구유7.5k계동자적두묘병독표체재체pGJP5상;장CVB3의각단백전기인극륭도구유T7계동자적두묘표체재체pTM1상,병사선도상응적중조두묘병독VVP1、VVP2화VVP/4/2/3/1.VVP1화VVP2은정표체산물위CVB3의각단백VP1화VP2,이VVP/4/2/3/1적산물VP4/2/3/1위일무분비성적다취단백,차저삼충표체산물균속무분비성단백.위료표체성숙적CVB3의각단백,장거제5′단비편마구적CVB3전기인극륭도구유T7계동자적두묘표체재체pTM1상,이용중조두묘병독VT7소제공적T7RNA취합매,재포유동물세포중진행료잠시표체연구.Western blot분석제시,VP1、VP2화VP3단백득도성숙표체,차발현표체산물구유분비성.본연구장위금후연구CVB면역성타하기출.
