CAJ | 학술논문

目的:构建CD137真核高效表达系统,深入研究CD137及其配体在细胞信号转导中的作用.方法:将构建有CD137全长cDNA序列的pCDNA3质粒(CMV-ILA-SEN,CIS)及pSV2-dhfr(含二氢叶酸还原酶基因),运用脂质体介导法共转染二氢叶酸还原酶缺陷的CHO细胞(dhfr-CHO);用G418筛选出阳性克隆;MTX压力选择系统诱导CD137在dhfr-CHO细胞的高效表达;RT-PCR、免疫细胞化学法及流式细胞术测定CD137的表达情况;3H-TdR掺入法进行活性研究.结果:CD137为膜型表达,CIS转化dhfr-CHO细胞CD137表达率为96.07%;活性研究显示CD137膜蛋白轻度促进抗CD3单抗诱导的PBMC增殖.结论:获得高效表达CD137的CHO细胞株,CD137膜蛋白促进抗CD3单抗诱导的PBMC增殖.
목적:구건CD137진핵고효표체계통,심입연구CD137급기배체재세포신호전도중적작용.방법:장구건유CD137전장cDNA서렬적pCDNA3질립(CMV-ILA-SEN,CIS)급pSV2-dhfr(함이경협산환원매기인),운용지질체개도법공전염이경협산환원매결함적CHO세포(dhfr-CHO);용G418사선출양성극륭;MTX압력선택계통유도CD137재dhfr-CHO세포적고효표체;RT-PCR、면역세포화학법급류식세포술측정CD137적표체정황;3H-TdR참입법진행활성연구.결과:CD137위막형표체,CIS전화dhfr-CHO세포CD137표체솔위96.07%;활성연구현시CD137막단백경도촉진항CD3단항유도적PBMC증식.결론:획득고효표체CD137적CHO세포주,CD137막단백촉진항CD3단항유도적PBMC증식.