生物化学与生物物理进展
生物化學與生物物理進展
생물화학여생물물리진전
PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS
2002年
5期
734-740
,共7页
王丰%陈霞芳%田毓华%吴继红%李凌%李川源%黄倩
王豐%陳霞芳%田毓華%吳繼紅%李凌%李川源%黃倩
왕봉%진하방%전육화%오계홍%리릉%리천원%황천
电穿孔%肿瘤基因治疗%免疫调节%血管生成
電穿孔%腫瘤基因治療%免疫調節%血管生成
전천공%종류기인치료%면역조절%혈관생성
利用携带绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)编码基因的表达质粒,测试电穿孔方法介导目的基因活体组织内转移的效率并优化电击参数.在此基础上采用电穿孔技术直接将编码白介素12(IL-12)、白介素2(IL-2)、粒单细胞克隆刺激因子(GM-CSF)等免疫调节因子或反义血管内皮细胞生长因子121(VEGF121)、可溶性血管内皮细胞膜受体(sFlk-1及ExTek)等血管生成抑制因子表达质粒转移至肿瘤局部.实验结果表明电穿孔介导GFP表达质粒肌肉内转移的效率较高,GFP可在肌细胞内持续高水平表达3周以上,而在肿瘤细胞内只能表达4～6 d,但高电压短脉冲电击组肿瘤内GFP阳性细胞数比低电压长脉冲组高2.68倍.多次电击介导IL-12表达质粒转移至肿瘤组织内,可有效地抑制小鼠膀胱癌BTT-gfp、人乳腺癌MCF-7及肝癌SMMC 7721-gfp的生长.MCF-7对血管生成抑制因子基因转移治疗较敏感,单独应用反义VEGF121、sFlk-1或ExTek即显示明确的治疗效果.SMMC 7721-gfp单独应用sFlk-1有效.小鼠膀胱癌对单独应用反义VEGF121、sFlk-1或ExTek治疗效果不理想,但联合应用sFlk-1和ExTek仍然可以有效地抑制肿瘤生长与转移,甚至使肿瘤缩小或消失.提示电穿孔技术是一项高效、安全、经济的体内基因转移方法.
利用攜帶綠色熒光蛋白(green fluorescent protein, GFP)編碼基因的錶達質粒,測試電穿孔方法介導目的基因活體組織內轉移的效率併優化電擊參數.在此基礎上採用電穿孔技術直接將編碼白介素12(IL-12)、白介素2(IL-2)、粒單細胞剋隆刺激因子(GM-CSF)等免疫調節因子或反義血管內皮細胞生長因子121(VEGF121)、可溶性血管內皮細胞膜受體(sFlk-1及ExTek)等血管生成抑製因子錶達質粒轉移至腫瘤跼部.實驗結果錶明電穿孔介導GFP錶達質粒肌肉內轉移的效率較高,GFP可在肌細胞內持續高水平錶達3週以上,而在腫瘤細胞內隻能錶達4～6 d,但高電壓短脈遲電擊組腫瘤內GFP暘性細胞數比低電壓長脈遲組高2.68倍.多次電擊介導IL-12錶達質粒轉移至腫瘤組織內,可有效地抑製小鼠膀胱癌BTT-gfp、人乳腺癌MCF-7及肝癌SMMC 7721-gfp的生長.MCF-7對血管生成抑製因子基因轉移治療較敏感,單獨應用反義VEGF121、sFlk-1或ExTek即顯示明確的治療效果.SMMC 7721-gfp單獨應用sFlk-1有效.小鼠膀胱癌對單獨應用反義VEGF121、sFlk-1或ExTek治療效果不理想,但聯閤應用sFlk-1和ExTek仍然可以有效地抑製腫瘤生長與轉移,甚至使腫瘤縮小或消失.提示電穿孔技術是一項高效、安全、經濟的體內基因轉移方法.
이용휴대록색형광단백(green fluorescent protein, GFP)편마기인적표체질립,측시전천공방법개도목적기인활체조직내전이적효솔병우화전격삼수.재차기출상채용전천공기술직접장편마백개소12(IL-12)、백개소2(IL-2)、립단세포극륭자격인자(GM-CSF)등면역조절인자혹반의혈관내피세포생장인자121(VEGF121)、가용성혈관내피세포막수체(sFlk-1급ExTek)등혈관생성억제인자표체질립전이지종류국부.실험결과표명전천공개도GFP표체질립기육내전이적효솔교고,GFP가재기세포내지속고수평표체3주이상,이재종류세포내지능표체4～6 d,단고전압단맥충전격조종류내GFP양성세포수비저전압장맥충조고2.68배.다차전격개도IL-12표체질립전이지종류조직내,가유효지억제소서방광암BTT-gfp、인유선암MCF-7급간암SMMC 7721-gfp적생장.MCF-7대혈관생성억제인자기인전이치료교민감,단독응용반의VEGF121、sFlk-1혹ExTek즉현시명학적치료효과.SMMC 7721-gfp단독응용sFlk-1유효.소서방광암대단독응용반의VEGF121、sFlk-1혹ExTek치료효과불이상,단연합응용sFlk-1화ExTek잉연가이유효지억제종류생장여전이,심지사종류축소혹소실.제시전천공기술시일항고효、안전、경제적체내기인전이방법.
