吉林农业大学学报
吉林農業大學學報
길임농업대학학보
JOURNAL OF JILIN AGRICUL TURAL UNIVERSITY
2002年
6期
65-67,71
,共4页
胡桂学%夏成柱%鲍志宏%单晓枫%杨明磊
鬍桂學%夏成柱%鮑誌宏%單曉楓%楊明磊
호계학%하성주%포지굉%단효풍%양명뢰
犬冠状病毒%纤突蛋白基因%分子克隆
犬冠狀病毒%纖突蛋白基因%分子剋隆
견관상병독%섬돌단백기인%분자극륭
以RT-PCR方法扩增出犬冠状病毒(CCv)YS1、CI1 2株国内分离病毒的部分纤突蛋白基因,经酶切鉴定为CCV特异性核苷酸片段.采用平端连接法将WizardTM PCR纯化试剂盒纯化的PCR产物克隆于pUC19Sma Ⅰ酶切位点上,获得YS1pUC19、CI1pUC19重组质粒.琼脂糖凝胶电泳鉴定表明:重组质粒大于蓝斑菌质粒.以Bam H Ⅰ、KpnⅠ双酶切重组质粒可获得比原PCR产物略大的核苷酸片段,并从中以PCR方法扩增出与原PCR产物大小相同的核苷酸片段.
以RT-PCR方法擴增齣犬冠狀病毒(CCv)YS1、CI1 2株國內分離病毒的部分纖突蛋白基因,經酶切鑒定為CCV特異性覈苷痠片段.採用平耑連接法將WizardTM PCR純化試劑盒純化的PCR產物剋隆于pUC19Sma Ⅰ酶切位點上,穫得YS1pUC19、CI1pUC19重組質粒.瓊脂糖凝膠電泳鑒定錶明:重組質粒大于藍斑菌質粒.以Bam H Ⅰ、KpnⅠ雙酶切重組質粒可穫得比原PCR產物略大的覈苷痠片段,併從中以PCR方法擴增齣與原PCR產物大小相同的覈苷痠片段.
이RT-PCR방법확증출견관상병독(CCv)YS1、CI1 2주국내분리병독적부분섬돌단백기인,경매절감정위CCV특이성핵감산편단.채용평단련접법장WizardTM PCR순화시제합순화적PCR산물극륭우pUC19Sma Ⅰ매절위점상,획득YS1pUC19、CI1pUC19중조질립.경지당응효전영감정표명:중조질립대우람반균질립.이Bam H Ⅰ、KpnⅠ쌍매절중조질립가획득비원PCR산물략대적핵감산편단,병종중이PCR방법확증출여원PCR산물대소상동적핵감산편단.
