高技术通讯
高技術通訊
고기술통신
HIGH TECHNOLOGY LETTERS
2001年
9期
13-17
,共5页
郑梦杰%范冬梅%熊冬生%彭晖%朱祯平%杨纯正
鄭夢傑%範鼕梅%熊鼕生%彭暉%硃禎平%楊純正
정몽걸%범동매%웅동생%팽휘%주정평%양순정
基因工程抗体,抗体F(ab')2片段,CD2o,B-淋巴细胞
基因工程抗體,抗體F(ab')2片段,CD2o,B-淋巴細胞
기인공정항체,항체F(ab')2편단,CD2o,B-림파세포
从抗CD20Fab'表达载体上利用PCR方法扩增并修饰其重链恒定区CH1C-末端的DNA序列,然后将修饰后的CH1DNA序列重组到原Fab'表达载体中,构建成抗CD20抗体片段F(ab')2表达载体.将该载体转化宿主大肠杆菌16C9,实现了抗CD20抗体片段F(ab')2在工程菌中的可溶性分泌表达.经分离纯化获得具有与抗原CD20特异结合的F(ab')2活性片段.竞争性免疫荧光实验的结果表明:抗CD20F(ab')2片段具有比Fab'更强的竞争性抑制亲本鼠源性单克隆抗体HI47与Daudi细胞表面CD20相结合的能力;用MTT法检测所得到的数据说明:F(ab')2比Fab'更为有效地抑制在体外培养的Daudi细胞的生长.
從抗CD20Fab'錶達載體上利用PCR方法擴增併脩飾其重鏈恆定區CH1C-末耑的DNA序列,然後將脩飾後的CH1DNA序列重組到原Fab'錶達載體中,構建成抗CD20抗體片段F(ab')2錶達載體.將該載體轉化宿主大腸桿菌16C9,實現瞭抗CD20抗體片段F(ab')2在工程菌中的可溶性分泌錶達.經分離純化穫得具有與抗原CD20特異結閤的F(ab')2活性片段.競爭性免疫熒光實驗的結果錶明:抗CD20F(ab')2片段具有比Fab'更彊的競爭性抑製親本鼠源性單剋隆抗體HI47與Daudi細胞錶麵CD20相結閤的能力;用MTT法檢測所得到的數據說明:F(ab')2比Fab'更為有效地抑製在體外培養的Daudi細胞的生長.
종항CD20Fab'표체재체상이용PCR방법확증병수식기중련항정구CH1C-말단적DNA서렬,연후장수식후적CH1DNA서렬중조도원Fab'표체재체중,구건성항CD20항체편단F(ab')2표체재체.장해재체전화숙주대장간균16C9,실현료항CD20항체편단F(ab')2재공정균중적가용성분비표체.경분리순화획득구유여항원CD20특이결합적F(ab')2활성편단.경쟁성면역형광실험적결과표명:항CD20F(ab')2편단구유비Fab'경강적경쟁성억제친본서원성단극륭항체HI47여Daudi세포표면CD20상결합적능력;용MTT법검측소득도적수거설명:F(ab')2비Fab'경위유효지억제재체외배양적Daudi세포적생장.
