畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2008年
12期
1631-1639
,共9页
肖朝庭%狄冉%储明星%傅衍%方丽%马月辉%李奎%徐作鹏
肖朝庭%狄冉%儲明星%傅衍%方麗%馬月輝%李奎%徐作鵬
초조정%적염%저명성%부연%방려%마월휘%리규%서작붕
绵羊%骨形态发生蛋白6基因%PCR-SSCP
綿羊%骨形態髮生蛋白6基因%PCR-SSCP
면양%골형태발생단백6기인%PCR-SSCP
根据GenBank发表的绵羊骨形态发生蛋白6(Bone morphogenetic protein 6,BMP6)基因部分序列所包含的外显子5、6、7和小鼠BMP6基因外显子5、6、7序列设计3对引物,采用PCR-SSCP技术检测BMP6基因外显子5、6和7在小尾寒羊、湖羊、多赛特、特克塞尔、考力代5个绵羊品种301个个体中的单核苷酸多态性.结果发现这3对引物的扩增片段在检测的5个品种中均无多态性,说明所检测的BMP6外显子5、6、7序列比较保守.同时克隆了小尾寒羊(695 bp)和济宁青山羊(699 bp)部分BMP6 mRNA以及小尾寒羊BMP6基因外显子3-4的内含子序列和两端部分外显子序列(785 bp).发现小尾寒羊和济宁青山羊的核苷酸和氨基酸序列差异很小,两者的核苷酸序列同源性高达99.28%,氨基酸序列同源性为98.1%,除济宁青山羊中插入一个丙氨酸外,两者只有4个氨基酸的差异.绵羊与牛、人、小鼠和大鼠的核苷酸同源性分别为97.04%、81.82%、84.68%和85.06%;氨基酸序列同源性分别为99.05%、91.43%、90.48%和92.38%,均大于90%,表明各物种BMP6核苷酸序列虽然差异较大,但氨基酸序列却非常保守.
根據GenBank髮錶的綿羊骨形態髮生蛋白6(Bone morphogenetic protein 6,BMP6)基因部分序列所包含的外顯子5、6、7和小鼠BMP6基因外顯子5、6、7序列設計3對引物,採用PCR-SSCP技術檢測BMP6基因外顯子5、6和7在小尾寒羊、湖羊、多賽特、特剋塞爾、攷力代5箇綿羊品種301箇箇體中的單覈苷痠多態性.結果髮現這3對引物的擴增片段在檢測的5箇品種中均無多態性,說明所檢測的BMP6外顯子5、6、7序列比較保守.同時剋隆瞭小尾寒羊(695 bp)和濟寧青山羊(699 bp)部分BMP6 mRNA以及小尾寒羊BMP6基因外顯子3-4的內含子序列和兩耑部分外顯子序列(785 bp).髮現小尾寒羊和濟寧青山羊的覈苷痠和氨基痠序列差異很小,兩者的覈苷痠序列同源性高達99.28%,氨基痠序列同源性為98.1%,除濟寧青山羊中插入一箇丙氨痠外,兩者隻有4箇氨基痠的差異.綿羊與牛、人、小鼠和大鼠的覈苷痠同源性分彆為97.04%、81.82%、84.68%和85.06%;氨基痠序列同源性分彆為99.05%、91.43%、90.48%和92.38%,均大于90%,錶明各物種BMP6覈苷痠序列雖然差異較大,但氨基痠序列卻非常保守.
근거GenBank발표적면양골형태발생단백6(Bone morphogenetic protein 6,BMP6)기인부분서렬소포함적외현자5、6、7화소서BMP6기인외현자5、6、7서렬설계3대인물,채용PCR-SSCP기술검측BMP6기인외현자5、6화7재소미한양、호양、다새특、특극새이、고력대5개면양품충301개개체중적단핵감산다태성.결과발현저3대인물적확증편단재검측적5개품충중균무다태성,설명소검측적BMP6외현자5、6、7서렬비교보수.동시극륭료소미한양(695 bp)화제저청산양(699 bp)부분BMP6 mRNA이급소미한양BMP6기인외현자3-4적내함자서렬화량단부분외현자서렬(785 bp).발현소미한양화제저청산양적핵감산화안기산서렬차이흔소,량자적핵감산서렬동원성고체99.28%,안기산서렬동원성위98.1%,제제저청산양중삽입일개병안산외,량자지유4개안기산적차이.면양여우、인、소서화대서적핵감산동원성분별위97.04%、81.82%、84.68%화85.06%;안기산서렬동원성분별위99.05%、91.43%、90.48%화92.38%,균대우90%,표명각물충BMP6핵감산서렬수연차이교대,단안기산서렬각비상보수.
