重庆师范大学学报(自然科学版)
重慶師範大學學報(自然科學版)
중경사범대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF CHONGQING NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2009年
2期
22-26,封3
,共6页
谢来峰%王文博%王磊%王望%徐存拴
謝來峰%王文博%王磊%王望%徐存拴
사래봉%왕문박%왕뢰%왕망%서존전
大鼠再生肝%树突状细胞%ox62免疫磁珠%标记蛋白%分布及数量变化
大鼠再生肝%樹突狀細胞%ox62免疫磁珠%標記蛋白%分佈及數量變化
대서재생간%수돌상세포%ox62면역자주%표기단백%분포급수량변화
探讨树突状细胞在大鼠再生肝中分布及数量变化,为深入研究其在肝再生进程中的作用奠定基础.制作大鼠2/3肝切除模型(PH),用两步灌流法分散肝脏细胞,用Percoll密度梯度离心和ox62免疫磁珠分离相结合方法分离树突状细胞(DC),用免疫组织化学方法定性、定位CD86和CD103在再生肝(RL)、分散的肝脏细胞及分离的树突状细胞中分布,用蛋白免疫印迹方法定量树突状细胞的CD86和CD103,用RT-PCR定量分离的树突状细胞CD86和CD103的mRNA.结果表明,0 h再生肝树突状细胞分布于肝血窦、中央静脉、胆管周围,12 h在远离中央静脉和胆管的部位出现,24 h呈弥散状分布,168 h分布与对照相同;从肝切除后0、2、6、12、24、30、36、72、120、168 h等10个时间点的大鼠再生肝中收获的树突状细胞平均数分别为每只大鼠1.55、1.59、1.87、2.46、1.49、2.73、3.87、6 04、6 52、8 40 百万个,CD86和CD103阳性细胞数目、细胞活性均在95%以上.上述结果说明在肝再生进程中树突状细胞的分布由肝血窦、中央静脉、胆管周围逐渐向全肝弥散,24 h弥散达到高峰,之后回落,至168 h分布与对照相同,但其数量随肝再生进程而增加.
探討樹突狀細胞在大鼠再生肝中分佈及數量變化,為深入研究其在肝再生進程中的作用奠定基礎.製作大鼠2/3肝切除模型(PH),用兩步灌流法分散肝髒細胞,用Percoll密度梯度離心和ox62免疫磁珠分離相結閤方法分離樹突狀細胞(DC),用免疫組織化學方法定性、定位CD86和CD103在再生肝(RL)、分散的肝髒細胞及分離的樹突狀細胞中分佈,用蛋白免疫印跡方法定量樹突狀細胞的CD86和CD103,用RT-PCR定量分離的樹突狀細胞CD86和CD103的mRNA.結果錶明,0 h再生肝樹突狀細胞分佈于肝血竇、中央靜脈、膽管週圍,12 h在遠離中央靜脈和膽管的部位齣現,24 h呈瀰散狀分佈,168 h分佈與對照相同;從肝切除後0、2、6、12、24、30、36、72、120、168 h等10箇時間點的大鼠再生肝中收穫的樹突狀細胞平均數分彆為每隻大鼠1.55、1.59、1.87、2.46、1.49、2.73、3.87、6 04、6 52、8 40 百萬箇,CD86和CD103暘性細胞數目、細胞活性均在95%以上.上述結果說明在肝再生進程中樹突狀細胞的分佈由肝血竇、中央靜脈、膽管週圍逐漸嚮全肝瀰散,24 h瀰散達到高峰,之後迴落,至168 h分佈與對照相同,但其數量隨肝再生進程而增加.
탐토수돌상세포재대서재생간중분포급수량변화,위심입연구기재간재생진정중적작용전정기출.제작대서2/3간절제모형(PH),용량보관류법분산간장세포,용Percoll밀도제도리심화ox62면역자주분리상결합방법분리수돌상세포(DC),용면역조직화학방법정성、정위CD86화CD103재재생간(RL)、분산적간장세포급분리적수돌상세포중분포,용단백면역인적방법정량수돌상세포적CD86화CD103,용RT-PCR정량분리적수돌상세포CD86화CD103적mRNA.결과표명,0 h재생간수돌상세포분포우간혈두、중앙정맥、담관주위,12 h재원리중앙정맥화담관적부위출현,24 h정미산상분포,168 h분포여대조상동;종간절제후0、2、6、12、24、30、36、72、120、168 h등10개시간점적대서재생간중수획적수돌상세포평균수분별위매지대서1.55、1.59、1.87、2.46、1.49、2.73、3.87、6 04、6 52、8 40 백만개,CD86화CD103양성세포수목、세포활성균재95%이상.상술결과설명재간재생진정중수돌상세포적분포유간혈두、중앙정맥、담관주위축점향전간미산,24 h미산체도고봉,지후회락,지168 h분포여대조상동,단기수량수간재생진정이증가.