中国病原生物学杂志
中國病原生物學雜誌
중국병원생물학잡지
JOURNAL OF PATHOGEN BIOLOGY
2008年
2期
81-85
,共5页
鲁会军%金宁一%韩松%郑敏%王凯%贾雷立%李昌
魯會軍%金寧一%韓鬆%鄭敏%王凱%賈雷立%李昌
로회군%금저일%한송%정민%왕개%가뢰립%리창
重组杆状病毒%表达%蛋白%鉴别诊断%ELISA
重組桿狀病毒%錶達%蛋白%鑒彆診斷%ELISA
중조간상병독%표체%단백%감별진단%ELISA
目的 建立鉴别自然感染口蹄疫动物和口蹄疫灭活疫苗免疫动物的诊断方法.方法 构建重组杆状病毒的转座质粒pFastBac-3AB,转化DH10 Bac感受态细菌,在体内进行重组,并经三重抗性与蓝白斑筛选,得到杆状病毒重组质粒Bacmid-3AB;将Bacmid-3AB转染Sf9细胞,获得重组杆状病毒.以重组杆状病毒表达的3AB蛋白为抗原建立鉴别口蹄疫感染与免疫动物的ELISA诊断方法,并对各种反应条件进行优化,包括抗原包被时间、包被浓度、封闭剂、酶标抗体工作浓度等.结果 获得了重组杆状病毒,成功表达了口蹄疫病毒3AB蛋白,并用纯化的3AB蛋白建立了检测口蹄疫病毒抗体的间接ELISA方法.用该方法检测FMDV感染动物和免疫动物血清抗3AB蛋白抗体,猪和牛感染血清检测的阳性率分别为83.3%和91.7%.结论 用纯化的口蹄疫病毒3AB蛋白建立了鉴别诊断口蹄疫感染与免疫动物的ELISA诊断方法.
目的 建立鑒彆自然感染口蹄疫動物和口蹄疫滅活疫苗免疫動物的診斷方法.方法 構建重組桿狀病毒的轉座質粒pFastBac-3AB,轉化DH10 Bac感受態細菌,在體內進行重組,併經三重抗性與藍白斑篩選,得到桿狀病毒重組質粒Bacmid-3AB;將Bacmid-3AB轉染Sf9細胞,穫得重組桿狀病毒.以重組桿狀病毒錶達的3AB蛋白為抗原建立鑒彆口蹄疫感染與免疫動物的ELISA診斷方法,併對各種反應條件進行優化,包括抗原包被時間、包被濃度、封閉劑、酶標抗體工作濃度等.結果 穫得瞭重組桿狀病毒,成功錶達瞭口蹄疫病毒3AB蛋白,併用純化的3AB蛋白建立瞭檢測口蹄疫病毒抗體的間接ELISA方法.用該方法檢測FMDV感染動物和免疫動物血清抗3AB蛋白抗體,豬和牛感染血清檢測的暘性率分彆為83.3%和91.7%.結論 用純化的口蹄疫病毒3AB蛋白建立瞭鑒彆診斷口蹄疫感染與免疫動物的ELISA診斷方法.
목적 건립감별자연감염구제역동물화구제역멸활역묘면역동물적진단방법.방법 구건중조간상병독적전좌질립pFastBac-3AB,전화DH10 Bac감수태세균,재체내진행중조,병경삼중항성여람백반사선,득도간상병독중조질립Bacmid-3AB;장Bacmid-3AB전염Sf9세포,획득중조간상병독.이중조간상병독표체적3AB단백위항원건립감별구제역감염여면역동물적ELISA진단방법,병대각충반응조건진행우화,포괄항원포피시간、포피농도、봉폐제、매표항체공작농도등.결과 획득료중조간상병독,성공표체료구제역병독3AB단백,병용순화적3AB단백건립료검측구제역병독항체적간접ELISA방법.용해방법검측FMDV감염동물화면역동물혈청항3AB단백항체,저화우감염혈청검측적양성솔분별위83.3%화91.7%.결론 용순화적구제역병독3AB단백건립료감별진단구제역감염여면역동물적ELISA진단방법.
