CAJ | 학술논문

目的:探讨载脂蛋白E(ApoE)在ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)和ATP结合盒转运蛋白G1(ABCG1)介导的胆固醇流出中的作用及可能机制.方法:将RAW 264.7细胞随机分为3组:空白对照组:用单纯培养基培养;低密度脂蛋白受体基因敲除(LDLr-/-)组:用20 mg/L LDLr-/-小鼠脂蛋白处理细胞;ApoE基因敲除(ApoE-/-)组:用20 mg/L ApoE-/-小鼠脂蛋白处理细胞.采用透射电镜和酶法检测细胞内脂质含量,用液闪仪技术检测胆固醇流出变化,用免疫印迹技术和实时定量PCR技术检测ABCA1和ABCG1的表达水平.结果:与对照组相比,LDLr-/-小鼠脂蛋白处理后细胞内脂质含量并未明显改变,而ApoE-/-小鼠脂蛋白处理48 h后,细胞内胆固醇酯增加了60%;同时,与LDLr-/-小鼠脂蛋白处理组相比,用ApoE-/-小鼠脂蛋白处理后,巨噬细胞胆固醇流出至载脂蛋白A-I(ApoA-I)和高密度脂蛋白(HDL)的量均明显降低.与对照组相比,LDLr-/-小鼠脂蛋白和ApoE-/-小鼠脂蛋白处理显著增加ABCA1和ABCG1的蛋白和mRNA水平,但是ApoE-/-小鼠脂蛋白对ABCA1和ABCG1蛋白和mRNA水平的诱导程度明显低于LDLr-/-小鼠脂蛋白.结论:ApoE在介导巨噬细胞胆固醇流出中发挥重要作用,该作用与其调节ABCA1和ABCG1的表达水平有关.
목적:탐토재지단백E(ApoE)재ATP결합합전운단백A1(ABCA1)화ATP결합합전운단백G1(ABCG1)개도적담고순류출중적작용급가능궤제.방법:장RAW 264.7세포수궤분위3조:공백대조조:용단순배양기배양;저밀도지단백수체기인고제(LDLr-/-)조:용20 mg/L LDLr-/-소서지단백처리세포;ApoE기인고제(ApoE-/-)조:용20 mg/L ApoE-/-소서지단백처리세포.채용투사전경화매법검측세포내지질함량,용액섬의기술검측담고순류출변화,용면역인적기술화실시정량PCR기술검측ABCA1화ABCG1적표체수평.결과:여대조조상비,LDLr-/-소서지단백처리후세포내지질함량병미명현개변,이ApoE-/-소서지단백처리48 h후,세포내담고순지증가료60%;동시,여LDLr-/-소서지단백처리조상비,용ApoE-/-소서지단백처리후,거서세포담고순류출지재지단백A-I(ApoA-I)화고밀도지단백(HDL)적량균명현강저.여대조조상비,LDLr-/-소서지단백화ApoE-/-소서지단백처리현저증가ABCA1화ABCG1적단백화mRNA수평,단시ApoE-/-소서지단백대ABCA1화ABCG1단백화mRNA수평적유도정도명현저우LDLr-/-소서지단백.결론:ApoE재개도거서세포담고순류출중발휘중요작용,해작용여기조절ABCA1화ABCG1적표체수평유관.