畜牧兽医学报
畜牧獸醫學報
축목수의학보
2012年
8期
1310-1316
,共7页
胡启蒙%张媛媛%陈振亮%王亮亮%李新红
鬍啟矇%張媛媛%陳振亮%王亮亮%李新紅
호계몽%장원원%진진량%왕량량%리신홍
猪%精子获能%酪氨酸磷酸化
豬%精子穫能%酪氨痠燐痠化
저%정자획능%락안산린산화
本研究对猪精子获能前后细胞亚组分蛋白进行分离以及对酪氨酸磷酸化蛋白进行鉴定,旨在为哺乳动物精子受精生物学研究奠定理论基础.利用动物精子体外获能培养、细胞亚组分分离技术及蛋白免疫印迹的方法,分离猪精子细胞亚组分蛋白及酪氨酸磷酸化蛋白鉴定.结果表明,猪精子经过获能培养后各项活力指标均得到显著提高,且与精子蛋白发生酪氨酸磷酸化修饰密切相关;获能精子中126、108、79 ku的高分子量蛋白磷酸化程度明显高于未获能精子;分子质量约为25、47、50 ku的膜蛋白及47 ku胞浆蛋白发生酪氨酸磷酸化,其中25、47 ku的膜蛋白酪氨酸磷酸化程度显著高于未获能精子(P<0.05);分子量约为23、37、42~50 ku的核蛋白发生酪氨酸磷酸化,获能精子中23 ku的核蛋白酪氨酸磷酸化程度显著高于未获能精子(P<0.05).结果提示,猪精子细胞不同亚组分中,发生酪氨酸磷酸化修饰的蛋白以膜蛋白及核蛋白为主,同时有少量的胞浆蛋白.
本研究對豬精子穫能前後細胞亞組分蛋白進行分離以及對酪氨痠燐痠化蛋白進行鑒定,旨在為哺乳動物精子受精生物學研究奠定理論基礎.利用動物精子體外穫能培養、細胞亞組分分離技術及蛋白免疫印跡的方法,分離豬精子細胞亞組分蛋白及酪氨痠燐痠化蛋白鑒定.結果錶明,豬精子經過穫能培養後各項活力指標均得到顯著提高,且與精子蛋白髮生酪氨痠燐痠化脩飾密切相關;穫能精子中126、108、79 ku的高分子量蛋白燐痠化程度明顯高于未穫能精子;分子質量約為25、47、50 ku的膜蛋白及47 ku胞漿蛋白髮生酪氨痠燐痠化,其中25、47 ku的膜蛋白酪氨痠燐痠化程度顯著高于未穫能精子(P<0.05);分子量約為23、37、42~50 ku的覈蛋白髮生酪氨痠燐痠化,穫能精子中23 ku的覈蛋白酪氨痠燐痠化程度顯著高于未穫能精子(P<0.05).結果提示,豬精子細胞不同亞組分中,髮生酪氨痠燐痠化脩飾的蛋白以膜蛋白及覈蛋白為主,同時有少量的胞漿蛋白.
본연구대저정자획능전후세포아조분단백진행분리이급대락안산린산화단백진행감정,지재위포유동물정자수정생물학연구전정이론기출.이용동물정자체외획능배양、세포아조분분리기술급단백면역인적적방법,분리저정자세포아조분단백급락안산린산화단백감정.결과표명,저정자경과획능배양후각항활력지표균득도현저제고,차여정자단백발생락안산린산화수식밀절상관;획능정자중126、108、79 ku적고분자량단백린산화정도명현고우미획능정자;분자질량약위25、47、50 ku적막단백급47 ku포장단백발생락안산린산화,기중25、47 ku적막단백락안산린산화정도현저고우미획능정자(P<0.05);분자량약위23、37、42~50 ku적핵단백발생락안산린산화,획능정자중23 ku적핵단백락안산린산화정도현저고우미획능정자(P<0.05).결과제시,저정자세포불동아조분중,발생락안산린산화수식적단백이막단백급핵단백위주,동시유소량적포장단백.