哈尔滨医科大学学报
哈爾濱醫科大學學報
합이빈의과대학학보
JOURNAL OF HARBIN MEDICAL UNIVERSITY
2003年
6期
465-467
,共3页
刘佳%杨力明%赵育莹%郭彩玲%杨宝峰%曲章义
劉佳%楊力明%趙育瑩%郭綵玲%楊寶峰%麯章義
류가%양력명%조육형%곽채령%양보봉%곡장의
流感病毒%RNA聚合酶%PB1亚基%亚克隆%表达
流感病毒%RNA聚閤酶%PB1亞基%亞剋隆%錶達
류감병독%RNA취합매%PB1아기%아극륭%표체
目的将流感病毒RNA聚合酶合酶PB1-1亚基进行亚克隆、表达,获得重组的亚克隆多肽,为进一步研究PB1亚基功能奠定基础.方法以PB1亚基cDNA为模板,用PCR方法扩增出PB1-1片段,应用定向克隆策略将扩增后片段与高效表达载体pQE30重组,阳性克隆重组质粒经酶切及测序鉴定,IPTG诱导各亚克隆系高效表达;优化表达条件.结果 PCR法扩增出487bp的片段,酶切及测序鉴定获得正确的重组质粒,在E.coli M15中表达得到相对分子量约为20KD的重组蛋白,获得重组多肽.结论成功地亚克隆及表达了流感病毒RNA聚合酶PB1-1亚基.
目的將流感病毒RNA聚閤酶閤酶PB1-1亞基進行亞剋隆、錶達,穫得重組的亞剋隆多肽,為進一步研究PB1亞基功能奠定基礎.方法以PB1亞基cDNA為模闆,用PCR方法擴增齣PB1-1片段,應用定嚮剋隆策略將擴增後片段與高效錶達載體pQE30重組,暘性剋隆重組質粒經酶切及測序鑒定,IPTG誘導各亞剋隆繫高效錶達;優化錶達條件.結果 PCR法擴增齣487bp的片段,酶切及測序鑒定穫得正確的重組質粒,在E.coli M15中錶達得到相對分子量約為20KD的重組蛋白,穫得重組多肽.結論成功地亞剋隆及錶達瞭流感病毒RNA聚閤酶PB1-1亞基.
목적장류감병독RNA취합매합매PB1-1아기진행아극륭、표체,획득중조적아극륭다태,위진일보연구PB1아기공능전정기출.방법이PB1아기cDNA위모판,용PCR방법확증출PB1-1편단,응용정향극륭책략장확증후편단여고효표체재체pQE30중조,양성극륭중조질립경매절급측서감정,IPTG유도각아극륭계고효표체;우화표체조건.결과 PCR법확증출487bp적편단,매절급측서감정획득정학적중조질립,재E.coli M15중표체득도상대분자량약위20KD적중조단백,획득중조다태.결론성공지아극륭급표체료류감병독RNA취합매PB1-1아기.
