科技导报
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과기도보
SCIENCE & TECHNOLOGY REVIEW
2005年
8期
31-34
,共4页
余珊珊%王毅彰%于舒洋%李宁
餘珊珊%王毅彰%于舒洋%李寧
여산산%왕의창%우서양%리저
人乳过氧化物酶(hLPO)%转基因小鼠%显微注射
人乳過氧化物酶(hLPO)%轉基因小鼠%顯微註射
인유과양화물매(hLPO)%전기인소서%현미주사
从人基因组PAC文库中筛选出人乳过氧化物酶(hLPO)基因,利用长片段PCR的方法获得hLPO基因5′端约3kb片段,通过酶切方法获得hLPO基因3′端约27kb片段,将这两部分拼接并克隆到乳腺特异性表达载体pBC 1上,构建以山羊β-casein启动区指导的hLPO的转基因表达载体pBC 1-hLPO.利用显微注射的方法获得28只F 0代小鼠,经PCR检测和Southem杂交分析证实,有5只小鼠(4♂,1♀)为整合hLPO基因的转基因阳性小鼠,整合率为17.86%,整合拷贝数在1至5之间.利用SDS-PAGE凝胶电泳和Westem blot印迹分析F 0、F 1代共3只雌性转基因小鼠乳样,结果表明hLPO重组蛋白的特异条带不明显.
從人基因組PAC文庫中篩選齣人乳過氧化物酶(hLPO)基因,利用長片段PCR的方法穫得hLPO基因5′耑約3kb片段,通過酶切方法穫得hLPO基因3′耑約27kb片段,將這兩部分拼接併剋隆到乳腺特異性錶達載體pBC 1上,構建以山羊β-casein啟動區指導的hLPO的轉基因錶達載體pBC 1-hLPO.利用顯微註射的方法穫得28隻F 0代小鼠,經PCR檢測和Southem雜交分析證實,有5隻小鼠(4♂,1♀)為整閤hLPO基因的轉基因暘性小鼠,整閤率為17.86%,整閤拷貝數在1至5之間.利用SDS-PAGE凝膠電泳和Westem blot印跡分析F 0、F 1代共3隻雌性轉基因小鼠乳樣,結果錶明hLPO重組蛋白的特異條帶不明顯.
종인기인조PAC문고중사선출인유과양화물매(hLPO)기인,이용장편단PCR적방법획득hLPO기인5′단약3kb편단,통과매절방법획득hLPO기인3′단약27kb편단,장저량부분병접병극륭도유선특이성표체재체pBC 1상,구건이산양β-casein계동구지도적hLPO적전기인표체재체pBC 1-hLPO.이용현미주사적방법획득28지F 0대소서,경PCR검측화Southem잡교분석증실,유5지소서(4♂,1♀)위정합hLPO기인적전기인양성소서,정합솔위17.86%,정합고패수재1지5지간.이용SDS-PAGE응효전영화Westem blot인적분석F 0、F 1대공3지자성전기인소서유양,결과표명hLPO중조단백적특이조대불명현.
