中国临床康复
中國臨床康複
중국림상강복
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATION
2006年
20期
110-112
,共3页
汪宗桂%郑文岭%马文丽%梁念慈
汪宗桂%鄭文嶺%馬文麗%樑唸慈
왕종계%정문령%마문려%량념자
人生长激素%遗传载体%电泳,琼脂凝胶
人生長激素%遺傳載體%電泳,瓊脂凝膠
인생장격소%유전재체%전영,경지응효
目的:构建ECHO克隆系统构建人生长激素的哺乳动物表达载体,以克服原核生物表达系统生产人生长激素存在的缺陷.方法:实验于2002-08在解放军广州军区广州总医院医学实验科进行.①先把人生长激素基因片段克隆到ECHO系统的供载体中,构建供载体pUni/Lox-HGH.②让该供载体与具Lox位点的受载体在Cre重组酶的作用下融合,构建出人生长激素的哺乳动物表达载体pcDNA4.1/pUni-HGH,使人生长激素基因处于CMV启动子的调控下,EcoRI单酶切及BamHI/EcoRI双酶切鉴定重组质粒.结果:由琼脂糖凝胶电泳和序列测定证实,用ECHO克隆系统构建的融合质粒中,确实含有人生长激素带内含子的基因序列.结论:用ECHO克隆系统可以构建人生长激素的哺乳动物表达载体,且方便、快捷,为取代原核生物表达系统生产人生长激素,提供了依据.
目的:構建ECHO剋隆繫統構建人生長激素的哺乳動物錶達載體,以剋服原覈生物錶達繫統生產人生長激素存在的缺陷.方法:實驗于2002-08在解放軍廣州軍區廣州總醫院醫學實驗科進行.①先把人生長激素基因片段剋隆到ECHO繫統的供載體中,構建供載體pUni/Lox-HGH.②讓該供載體與具Lox位點的受載體在Cre重組酶的作用下融閤,構建齣人生長激素的哺乳動物錶達載體pcDNA4.1/pUni-HGH,使人生長激素基因處于CMV啟動子的調控下,EcoRI單酶切及BamHI/EcoRI雙酶切鑒定重組質粒.結果:由瓊脂糖凝膠電泳和序列測定證實,用ECHO剋隆繫統構建的融閤質粒中,確實含有人生長激素帶內含子的基因序列.結論:用ECHO剋隆繫統可以構建人生長激素的哺乳動物錶達載體,且方便、快捷,為取代原覈生物錶達繫統生產人生長激素,提供瞭依據.
목적:구건ECHO극륭계통구건인생장격소적포유동물표체재체,이극복원핵생물표체계통생산인생장격소존재적결함.방법:실험우2002-08재해방군엄주군구엄주총의원의학실험과진행.①선파인생장격소기인편단극륭도ECHO계통적공재체중,구건공재체pUni/Lox-HGH.②양해공재체여구Lox위점적수재체재Cre중조매적작용하융합,구건출인생장격소적포유동물표체재체pcDNA4.1/pUni-HGH,사인생장격소기인처우CMV계동자적조공하,EcoRI단매절급BamHI/EcoRI쌍매절감정중조질립.결과:유경지당응효전영화서렬측정증실,용ECHO극륭계통구건적융합질립중,학실함유인생장격소대내함자적기인서렬.결론:용ECHO극륭계통가이구건인생장격소적포유동물표체재체,차방편、쾌첩,위취대원핵생물표체계통생산인생장격소,제공료의거.
