CAJ | 학술논문

为建立适于SDS-PAGE分析的蚜虫蛋白质样品制备平台,以便为蚜虫蛋白质的双向电泳分析奠定基础,本研究比较了TCA/丙酮沉淀、PEG提取、饱和酚抽提和直接裂解4种蛋白质提取方法.结果表明:不同样品制备方法的蛋白提取率有显著的差异,其中直接裂解法的提取率最高,为17.43 mg/g;其次是饱和酚抽提法,提取率为12.30 mg/g;而PEG制备法提取率最低,只有7.96 mg/g.利用SDS-PAGE电泳对不同的蛋白质样品进行了分析,发现在凝胶图谱上显现的条带也有明显的差异,其中饱和酚抽提法显现的条带数最多,为36条,且从14.4 kDa～116.0 kDa范围有广泛分布,条带清晰;PEG提取法条带数为30条,一些蛋白条带丢失或不明显;TCA/丙酮沉淀法的蛋白条带集中分布在25.0 kDa～67.0 kDa区域;直接裂解法条带数仅为24条,且小分子量的条带可辩率很低.通过以上结果可以得出,饱和酚抽提法最适用于蚜虫全蛋白样品的制备.
위건립괄우SDS-PAGE분석적아충단백질양품제비평태,이편위아충단백질적쌍향전영분석전정기출,본연구비교료TCA/병동침정、PEG제취、포화분추제화직접렬해4충단백질제취방법.결과표명:불동양품제비방법적단백제취솔유현저적차이,기중직접렬해법적제취솔최고,위17.43 mg/g;기차시포화분추제법,제취솔위12.30 mg/g;이PEG제비법제취솔최저,지유7.96 mg/g.이용SDS-PAGE전영대불동적단백질양품진행료분석,발현재응효도보상현현적조대야유명현적차이,기중포화분추제법현현적조대수최다,위36조,차종14.4 kDa～116.0 kDa범위유엄범분포,조대청석;PEG제취법조대수위30조,일사단백조대주실혹불명현;TCA/병동침정법적단백조대집중분포재25.0 kDa～67.0 kDa구역;직접렬해법조대수부위24조,차소분자량적조대가변솔흔저.통과이상결과가이득출,포화분추제법최괄용우아충전단백양품적제비.