肿瘤
腫瘤
종류
TUMOR
2011年
1期
22-27
,共6页
结直肠肿瘤%1-磷脂酰肌醇-3激酶,p110β亚单位%RNA干扰%细胞增殖%细胞凋亡
結直腸腫瘤%1-燐脂酰肌醇-3激酶,p110β亞單位%RNA榦擾%細胞增殖%細胞凋亡
결직장종류%1-린지선기순-3격매,p110β아단위%RNA간우%세포증식%세포조망
目的:探讨RNA干扰靶向抑制PIK3CB基因(编码PI3Kp110 β蛋白)的表达对结肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的影响.方法:设计3条针对PIK3CB基因的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)片段及1条阴性对照siRNA,分别瞬时转染结肠癌HCTll6细胞.用Real time PCR及Western印迹法筛选出1条抑制效率最高的PIK3CB-siRNA序列,然后进行CCK一8细胞增殖实验,并采用.IC-1染色法检测线粒体膜电位(△Ψm)的变化.结果:经转染PIK3CB-siRNA-179序列的HCTll6细胞中P13Kp110 B mRNA及蛋白表达降低最为明显,抑制率达80%,选择该条siRNA作为有效干扰组进行后续实验.CCK-8细胞增殖实验显示,瞬时转染24、48及72 h后,PIK3CB-siRNA-179组细胞的相对存活率较阴性对照组细胞明显降低,其中以24 h及48 h降低最为明显(P＜0.05).JC-1染色结果显示,瞬时转染48 h后PIK3CB-siRNA-179组细胞的线粒体膜电位较阴性对照组细胞明显降低.结论:抑制P13Kp110 B蛋白表达可降低结肠癌HCT116细胞的增殖速度,诱导细胞的凋亡,推测PIK3CB基因可能成为结肠癌基因治疗的一个新靶点.
目的:探討RNA榦擾靶嚮抑製PIK3CB基因(編碼PI3Kp110 β蛋白)的錶達對結腸癌HCT116細胞增殖和凋亡的影響.方法:設計3條針對PIK3CB基因的小榦擾RNA(small interfering RNA,siRNA)片段及1條陰性對照siRNA,分彆瞬時轉染結腸癌HCTll6細胞.用Real time PCR及Western印跡法篩選齣1條抑製效率最高的PIK3CB-siRNA序列,然後進行CCK一8細胞增殖實驗,併採用.IC-1染色法檢測線粒體膜電位(△Ψm)的變化.結果:經轉染PIK3CB-siRNA-179序列的HCTll6細胞中P13Kp110 B mRNA及蛋白錶達降低最為明顯,抑製率達80%,選擇該條siRNA作為有效榦擾組進行後續實驗.CCK-8細胞增殖實驗顯示,瞬時轉染24、48及72 h後,PIK3CB-siRNA-179組細胞的相對存活率較陰性對照組細胞明顯降低,其中以24 h及48 h降低最為明顯(P＜0.05).JC-1染色結果顯示,瞬時轉染48 h後PIK3CB-siRNA-179組細胞的線粒體膜電位較陰性對照組細胞明顯降低.結論:抑製P13Kp110 B蛋白錶達可降低結腸癌HCT116細胞的增殖速度,誘導細胞的凋亡,推測PIK3CB基因可能成為結腸癌基因治療的一箇新靶點.
목적:탐토RNA간우파향억제PIK3CB기인(편마PI3Kp110 β단백)적표체대결장암HCT116세포증식화조망적영향.방법:설계3조침대PIK3CB기인적소간우RNA(small interfering RNA,siRNA)편단급1조음성대조siRNA,분별순시전염결장암HCTll6세포.용Real time PCR급Western인적법사선출1조억제효솔최고적PIK3CB-siRNA서렬,연후진행CCK일8세포증식실험,병채용.IC-1염색법검측선립체막전위(△Ψm)적변화.결과:경전염PIK3CB-siRNA-179서렬적HCTll6세포중P13Kp110 B mRNA급단백표체강저최위명현,억제솔체80%,선택해조siRNA작위유효간우조진행후속실험.CCK-8세포증식실험현시,순시전염24、48급72 h후,PIK3CB-siRNA-179조세포적상대존활솔교음성대조조세포명현강저,기중이24 h급48 h강저최위명현(P＜0.05).JC-1염색결과현시,순시전염48 h후PIK3CB-siRNA-179조세포적선립체막전위교음성대조조세포명현강저.결론:억제P13Kp110 B단백표체가강저결장암HCT116세포적증식속도,유도세포적조망,추측PIK3CB기인가능성위결장암기인치료적일개신파점.
