解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2011年
3期
356-360
,共5页
刘承杏%陈学秋%郭家智%戴纪男%孙俊%桂莉%陆地
劉承杏%陳學鞦%郭傢智%戴紀男%孫俊%桂莉%陸地
류승행%진학추%곽가지%대기남%손준%계리%륙지
MG63细胞%同型半胱氨酸%活性氧%荧光探针%Hoechst 33342/%PI核双染法%免疫印迹法
MG63細胞%同型半胱氨痠%活性氧%熒光探針%Hoechst 33342/%PI覈雙染法%免疫印跡法
MG63세포%동형반광안산%활성양%형광탐침%Hoechst 33342/%PI핵쌍염법%면역인적법
目的 探讨高同型半胱氨酸(HHcy)诱导人成骨肉瘤MG63细胞损伤的分子机制.方法 体外培养的人成骨肉瘤MG63细胞经不同浓度(0.001mol/L、0.003mol/L和0.005mol/L)的Hcy处理不同时间后,采用2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸盐(H2DCFDA)探针在荧光分光光度计下检测细胞内活性氧(ROS)变化水平;通过Hoechst 33342/碘化丙啶(PI)核双染法在荧光显微镜下观察计数凋亡和坏死细胞;采用Western blotting法检测促凋亡相关蛋白Caspase-3和Bax的表达变化.结果在高浓度的Hcy刺激下,以剂量和时间依赖的方式上调MG63细胞内 ROS 含量(P<0.05);同时,凋亡相关蛋白Caspase-3和Bax的表达明显增加,从而诱导MG63细胞的死亡.结论 高浓度Hcy可通过增加MG63细胞内ROS的含量,上调凋亡相关蛋白Caspase-3和Bax的表达,导致MG63细胞的氧化损伤.
目的 探討高同型半胱氨痠(HHcy)誘導人成骨肉瘤MG63細胞損傷的分子機製.方法 體外培養的人成骨肉瘤MG63細胞經不同濃度(0.001mol/L、0.003mol/L和0.005mol/L)的Hcy處理不同時間後,採用2',7'-二氯二氫熒光素二乙痠鹽(H2DCFDA)探針在熒光分光光度計下檢測細胞內活性氧(ROS)變化水平;通過Hoechst 33342/碘化丙啶(PI)覈雙染法在熒光顯微鏡下觀察計數凋亡和壞死細胞;採用Western blotting法檢測促凋亡相關蛋白Caspase-3和Bax的錶達變化.結果在高濃度的Hcy刺激下,以劑量和時間依賴的方式上調MG63細胞內 ROS 含量(P<0.05);同時,凋亡相關蛋白Caspase-3和Bax的錶達明顯增加,從而誘導MG63細胞的死亡.結論 高濃度Hcy可通過增加MG63細胞內ROS的含量,上調凋亡相關蛋白Caspase-3和Bax的錶達,導緻MG63細胞的氧化損傷.
목적 탐토고동형반광안산(HHcy)유도인성골육류MG63세포손상적분자궤제.방법 체외배양적인성골육류MG63세포경불동농도(0.001mol/L、0.003mol/L화0.005mol/L)적Hcy처리불동시간후,채용2',7'-이록이경형광소이을산염(H2DCFDA)탐침재형광분광광도계하검측세포내활성양(ROS)변화수평;통과Hoechst 33342/전화병정(PI)핵쌍염법재형광현미경하관찰계수조망화배사세포;채용Western blotting법검측촉조망상관단백Caspase-3화Bax적표체변화.결과재고농도적Hcy자격하,이제량화시간의뢰적방식상조MG63세포내 ROS 함량(P<0.05);동시,조망상관단백Caspase-3화Bax적표체명현증가,종이유도MG63세포적사망.결론 고농도Hcy가통과증가MG63세포내ROS적함량,상조조망상관단백Caspase-3화Bax적표체,도치MG63세포적양화손상.
