林业科技开发
林業科技開髮
임업과기개발
CHINA FORESTRY SCIENCE AND TECHNOLOGY
2012年
2期
29-32
,共4页
廖盼华%汪庆%李亚%姚淦%杨如同%王淑安
廖盼華%汪慶%李亞%姚淦%楊如同%王淑安
료반화%왕경%리아%요감%양여동%왕숙안
南方红豆杉%ISSR%体系优化%正交设计
南方紅豆杉%ISSR%體繫優化%正交設計
남방홍두삼%ISSR%체계우화%정교설계
以南方红豆杉DNA为模板,采用正交试验设计对影响南方红豆杉ISSR -PCR扩增的参数进行了优化.结果表明较佳的南方红豆杉ISSR-PCR的反应体系(20 μL)为模板DNA 60 ng,10×PCR buffer 2.0μL,25 mmol/L的MgCl2 1.0 μL,2.5 mmol/L的dNTPs 1.0 μL,10μmol/L的引物1.0 μL和反应酶0.2U.适宜的扩增条件为94℃预变性4 min,41个PCR循环(94℃变性30 s,54.5℃退火45 s),72℃延伸80 s,72℃延伸5 min,4℃保存.
以南方紅豆杉DNA為模闆,採用正交試驗設計對影響南方紅豆杉ISSR -PCR擴增的參數進行瞭優化.結果錶明較佳的南方紅豆杉ISSR-PCR的反應體繫(20 μL)為模闆DNA 60 ng,10×PCR buffer 2.0μL,25 mmol/L的MgCl2 1.0 μL,2.5 mmol/L的dNTPs 1.0 μL,10μmol/L的引物1.0 μL和反應酶0.2U.適宜的擴增條件為94℃預變性4 min,41箇PCR循環(94℃變性30 s,54.5℃退火45 s),72℃延伸80 s,72℃延伸5 min,4℃保存.
이남방홍두삼DNA위모판,채용정교시험설계대영향남방홍두삼ISSR -PCR확증적삼수진행료우화.결과표명교가적남방홍두삼ISSR-PCR적반응체계(20 μL)위모판DNA 60 ng,10×PCR buffer 2.0μL,25 mmol/L적MgCl2 1.0 μL,2.5 mmol/L적dNTPs 1.0 μL,10μmol/L적인물1.0 μL화반응매0.2U.괄의적확증조건위94℃예변성4 min,41개PCR순배(94℃변성30 s,54.5℃퇴화45 s),72℃연신80 s,72℃연신5 min,4℃보존.
