CAJ | 학술논문

目的:研究12-脂氧合酶(12-lipoxygenase,12-LOX)在人肝癌细胞株SMMC-7721中的表达,以及选择性12-LOX抑制剂黄芩素对人肝癌细胞SMMC-7721生长、凋亡的影响.方法:采用免疫细胞化学染色及RT-PCR检测12-LOX的蛋白质和mRNA在SMMC-7721中的表达.应用MTT、流式细胞术及TUNEL检测细胞生长及凋亡.蛋白印迹法检测分析Caspase-3,Bcl-2,Bax,phospho-ERK1/2,ERK1/2和β-actin蛋白质的表达.结果:免疫细胞化学技术显示12-LOX蛋白表达于SMMC-7721细胞质.RT-PCR检测到黄芩素呈浓度-时间依赖性地抑制12-LOX mRNA表达.采用黄芩素小同浓度或不同时间段干预细胞SMMC-7721,MTT法检测细胞增殖呈剂量、时问依赖性的下降.原位末端转移酶标记技术及流式细胞仪分析证实12-LOX抑制剂诱导细胞凋亡.蛋白印迹法检测显示,黄芩素干预后,Bcl-2蛋白表达明显下降和Bax蛋白轻微上升,细胞凋亡蛋白酶-3活性水平与黄芩素浓度正相关,黄芩素对细胞凋亡相关蛋白的影响被12 (S)-HETE逆转,12(5)-HETE可能激活ERK1/2磷酸化.结论:人肝癌细胞株SMMC-7721存在12-LOX的表达,12-LOX抑制剂黄芩素可抑制细胞生长和诱导细胞凋亡.
목적:연구12-지양합매(12-lipoxygenase,12-LOX)재인간암세포주SMMC-7721중적표체,이급선택성12-LOX억제제황금소대인간암세포SMMC-7721생장、조망적영향.방법:채용면역세포화학염색급RT-PCR검측12-LOX적단백질화mRNA재SMMC-7721중적표체.응용MTT、류식세포술급TUNEL검측세포생장급조망.단백인적법검측분석Caspase-3,Bcl-2,Bax,phospho-ERK1/2,ERK1/2화β-actin단백질적표체.결과:면역세포화학기술현시12-LOX단백표체우SMMC-7721세포질.RT-PCR검측도황금소정농도-시간의뢰성지억제12-LOX mRNA표체.채용황금소소동농도혹불동시간단간예세포SMMC-7721,MTT법검측세포증식정제량、시문의뢰성적하강.원위말단전이매표기기술급류식세포의분석증실12-LOX억제제유도세포조망.단백인적법검측현시,황금소간예후,Bcl-2단백표체명현하강화Bax단백경미상승,세포조망단백매-3활성수평여황금소농도정상관,황금소대세포조망상관단백적영향피12 (S)-HETE역전,12(5)-HETE가능격활ERK1/2린산화.결론:인간암세포주SMMC-7721존재12-LOX적표체,12-LOX억제제황금소가억제세포생장화유도세포조망.