中华眼底病杂志
中華眼底病雜誌
중화안저병잡지
CHINESE JOURNAL OF OCULAR FUNDUS DISEASES
2009年
2期
103-107
,共5页
杨一涛%唐罗生%曾祥云%蒋怡平%袁思奇
楊一濤%唐囉生%曾祥雲%蔣怡平%袁思奇
양일도%당라생%증상운%장이평%원사기
视网膜母细胞瘤/治疗%细胞周期/药物作用%细胞凋亡%褪黑素
視網膜母細胞瘤/治療%細胞週期/藥物作用%細胞凋亡%褪黑素
시망막모세포류/치료%세포주기/약물작용%세포조망%퇴흑소
Retinoblastoma/therapy%Cell cycle/drug effects%Apoptosis%Melatonin
目的 探讨褪黑素(MLT)对视网膜母细胞瘤(RB)HXO-RB44细胞增生活性的影响及相关机制.方法 利用四氮唑化合物(MTT)比色法,观察不同浓度的MLT对RB HXO-RB44细胞增生活性的影响;利用10-10、10-9、10-8、10-7 mmol/L的MLT对RB HXO-RB44分别进行干预,采用Hoechst荧光染色观察细胞凋亡的形态学变化;利用流式细胞仪测定不同浓度的MLT干预24 h后,RB HXO-RB44细胞内活性氧(ROS)的表达、细胞周期与凋亡情况. 结果 浓度为10-7 mmol/L以下的MLT对HXO-RB44细胞并无抑制作用(P值均>0.05).10-6 mmol/L以上的MLT能够显著抑制HXO-RB44细胞增生(P<0.01).浓度为10-6、10-5、10-4 mmol/L的MLT干预后,随药物浓度的升高,HXO-RB44细胞内ROS的表达逐渐升高.Hoechst染色显示:不同浓度的褪黑素分别作用于培养的HXO-RB44细胞4、8、12、24 h后,细胞核固缩、核碎裂增多,细胞凋亡的程度随着MLT浓度的增大而加重.流式细胞仪检测:药物干预后,G0/G1期细胞明显增多,S期细胞减少,G2/M期细胞相对增多,随着MLT浓度的升高,HXO-RB44细胞凋亡率明显升高. 结论 浓度大于10-6 mmol/L的MLT能够有效地抑制HXO-RB44细胞增生,其抑制效率随药物浓度的升高和作用时间的延长而增强;MLT的抗细胞增殖作用可能与其诱导HXO-RB44细胞内的活性氧产生、阻滞细胞周期于G0/G1期并诱导细胞凋亡有关.
目的 探討褪黑素(MLT)對視網膜母細胞瘤(RB)HXO-RB44細胞增生活性的影響及相關機製.方法 利用四氮唑化閤物(MTT)比色法,觀察不同濃度的MLT對RB HXO-RB44細胞增生活性的影響;利用10-10、10-9、10-8、10-7 mmol/L的MLT對RB HXO-RB44分彆進行榦預,採用Hoechst熒光染色觀察細胞凋亡的形態學變化;利用流式細胞儀測定不同濃度的MLT榦預24 h後,RB HXO-RB44細胞內活性氧(ROS)的錶達、細胞週期與凋亡情況. 結果 濃度為10-7 mmol/L以下的MLT對HXO-RB44細胞併無抑製作用(P值均>0.05).10-6 mmol/L以上的MLT能夠顯著抑製HXO-RB44細胞增生(P<0.01).濃度為10-6、10-5、10-4 mmol/L的MLT榦預後,隨藥物濃度的升高,HXO-RB44細胞內ROS的錶達逐漸升高.Hoechst染色顯示:不同濃度的褪黑素分彆作用于培養的HXO-RB44細胞4、8、12、24 h後,細胞覈固縮、覈碎裂增多,細胞凋亡的程度隨著MLT濃度的增大而加重.流式細胞儀檢測:藥物榦預後,G0/G1期細胞明顯增多,S期細胞減少,G2/M期細胞相對增多,隨著MLT濃度的升高,HXO-RB44細胞凋亡率明顯升高. 結論 濃度大于10-6 mmol/L的MLT能夠有效地抑製HXO-RB44細胞增生,其抑製效率隨藥物濃度的升高和作用時間的延長而增彊;MLT的抗細胞增殖作用可能與其誘導HXO-RB44細胞內的活性氧產生、阻滯細胞週期于G0/G1期併誘導細胞凋亡有關.
목적 탐토퇴흑소(MLT)대시망막모세포류(RB)HXO-RB44세포증생활성적영향급상관궤제.방법 이용사담서화합물(MTT)비색법,관찰불동농도적MLT대RB HXO-RB44세포증생활성적영향;이용10-10、10-9、10-8、10-7 mmol/L적MLT대RB HXO-RB44분별진행간예,채용Hoechst형광염색관찰세포조망적형태학변화;이용류식세포의측정불동농도적MLT간예24 h후,RB HXO-RB44세포내활성양(ROS)적표체、세포주기여조망정황. 결과 농도위10-7 mmol/L이하적MLT대HXO-RB44세포병무억제작용(P치균>0.05).10-6 mmol/L이상적MLT능구현저억제HXO-RB44세포증생(P<0.01).농도위10-6、10-5、10-4 mmol/L적MLT간예후,수약물농도적승고,HXO-RB44세포내ROS적표체축점승고.Hoechst염색현시:불동농도적퇴흑소분별작용우배양적HXO-RB44세포4、8、12、24 h후,세포핵고축、핵쇄렬증다,세포조망적정도수착MLT농도적증대이가중.류식세포의검측:약물간예후,G0/G1기세포명현증다,S기세포감소,G2/M기세포상대증다,수착MLT농도적승고,HXO-RB44세포조망솔명현승고. 결론 농도대우10-6 mmol/L적MLT능구유효지억제HXO-RB44세포증생,기억제효솔수약물농도적승고화작용시간적연장이증강;MLT적항세포증식작용가능여기유도HXO-RB44세포내적활성양산생、조체세포주기우G0/G1기병유도세포조망유관.
Objective To investigate inhibited effects of melatonin (MLT) on proliferative activity of retinoblastoma cell line HXO-RB44 and its related mechanism. Methods HXO-RB44 cells were treated by MLT of different concentration (10-10, 10-9, 10-8, 10-7 mmol/L. Cell counting and tetrazolium dye-reduction assay (MTT) were used to determine the effect of MLT on the survival and proliferation of HXO-RB44 cells. Apoptotic nuclei were further analyzed by Hoechst-PI fluorescence staining. Flow eytometry was used to measure the fluorescent intensity of ROS, cell cycle distribution and apoptosis. Results 10-6 mmol/L (or exceed) of MLT could inhibit the proliferation of HXO-RB44 cells in vitro while 10-7 mmol/L (or below) of MLT couldn't. With the increase of MLT concentration from 10-10 mmol/L to 10-7mmol/L, HXO-RB44 cells gradually increased the expression of ROS. Hoechst staining showed that 4, 8, 12 and 24 hours after the incubation with MLT, the nuclear pyknosis and nuclear fragmentation increased in HXO-RB44 cells. The extent of apoptosis was proportional to the concentrations of MLT. Flow cytometry revealed that with the increasing of MLT concentration, G0/G1and G2/M phase cells increased, S phase cells decreased. The apoptotic rate was also increased. Conclusion 10-6 M of MLT could inhibit the proliferation of HXO-RB44 cells. This effect may relate to the increased ROS expression, cell cycle arrest at G0/G1phase and apoptosis of HXO-RB44 cells.
