中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2006年
4期
667-672
,共6页
王昕%史斌%王申五%董建强%崔建英%韩淑霞
王昕%史斌%王申五%董建彊%崔建英%韓淑霞
왕흔%사빈%왕신오%동건강%최건영%한숙하
慢性粒细胞白血病%热休克蛋白%gp96%肿瘤免疫%热应激
慢性粒細胞白血病%熱休剋蛋白%gp96%腫瘤免疫%熱應激
만성립세포백혈병%열휴극단백%gp96%종류면역%열응격
本研究查明不同热应激条件对慢性粒细胞白血病细胞系K562细胞中热休克蛋白gp96表达量的影响,为寻找增加K562细胞中gp96的提取量的最佳热应激条件提供实验依据.用免疫组织化学方法检测经38、40、42、44、46及48℃水浴热休克处理30分钟后的K562细胞中gp96表达量的变化;以平均阳性细胞百分率和平均荧光强度为指标,用流式细胞术研究40、44、48及52℃各水浴热休克处理30分钟对 K562细胞中gp96表达量的影响;利用免疫印记原理,用Western blot技术研究K562细胞经40、44、48与52℃水浴各休克处理30分钟后gp96表达量的变化.结果表明:免疫组织化学方法显示gp96主要在胞浆内表达,在48℃水浴热休克处理30分钟时,强阳性的细胞数最多,积分也最高;流式细胞术显示平均阳性细胞百分率和平均荧光强度均在48℃水浴热休克处理30分钟组达高峰,各温度间gp96表达量的差异有统计学意义;Western blot显示48℃水浴热休克处理30分钟时gp96的表达量达到高峰,各温度间gp96表达量的差异有统计学意义.结论: 48℃水浴热休克处理30分钟,gp96在K562细胞中的表达量达到高峰,该条件可作为提取K562细胞gp96的一个有效预处理条件.
本研究查明不同熱應激條件對慢性粒細胞白血病細胞繫K562細胞中熱休剋蛋白gp96錶達量的影響,為尋找增加K562細胞中gp96的提取量的最佳熱應激條件提供實驗依據.用免疫組織化學方法檢測經38、40、42、44、46及48℃水浴熱休剋處理30分鐘後的K562細胞中gp96錶達量的變化;以平均暘性細胞百分率和平均熒光彊度為指標,用流式細胞術研究40、44、48及52℃各水浴熱休剋處理30分鐘對 K562細胞中gp96錶達量的影響;利用免疫印記原理,用Western blot技術研究K562細胞經40、44、48與52℃水浴各休剋處理30分鐘後gp96錶達量的變化.結果錶明:免疫組織化學方法顯示gp96主要在胞漿內錶達,在48℃水浴熱休剋處理30分鐘時,彊暘性的細胞數最多,積分也最高;流式細胞術顯示平均暘性細胞百分率和平均熒光彊度均在48℃水浴熱休剋處理30分鐘組達高峰,各溫度間gp96錶達量的差異有統計學意義;Western blot顯示48℃水浴熱休剋處理30分鐘時gp96的錶達量達到高峰,各溫度間gp96錶達量的差異有統計學意義.結論: 48℃水浴熱休剋處理30分鐘,gp96在K562細胞中的錶達量達到高峰,該條件可作為提取K562細胞gp96的一箇有效預處理條件.
본연구사명불동열응격조건대만성립세포백혈병세포계K562세포중열휴극단백gp96표체량적영향,위심조증가K562세포중gp96적제취량적최가열응격조건제공실험의거.용면역조직화학방법검측경38、40、42、44、46급48℃수욕열휴극처리30분종후적K562세포중gp96표체량적변화;이평균양성세포백분솔화평균형광강도위지표,용류식세포술연구40、44、48급52℃각수욕열휴극처리30분종대 K562세포중gp96표체량적영향;이용면역인기원리,용Western blot기술연구K562세포경40、44、48여52℃수욕각휴극처리30분종후gp96표체량적변화.결과표명:면역조직화학방법현시gp96주요재포장내표체,재48℃수욕열휴극처리30분종시,강양성적세포수최다,적분야최고;류식세포술현시평균양성세포백분솔화평균형광강도균재48℃수욕열휴극처리30분종조체고봉,각온도간gp96표체량적차이유통계학의의;Western blot현시48℃수욕열휴극처리30분종시gp96적표체량체도고봉,각온도간gp96표체량적차이유통계학의의.결론: 48℃수욕열휴극처리30분종,gp96재K562세포중적표체량체도고봉,해조건가작위제취K562세포gp96적일개유효예처리조건.
