南京医科大学学报（自然科学版）
南京醫科大學學報（自然科學版）
남경의과대학학보（자연과학판）
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINALIS NANJING
2006年
10期
913-917,封二
,共6页
顾镭%邢美芬%季晓辉%孙志达%杨晓帆%王慧娟%张明顺
顧鐳%邢美芬%季曉輝%孫誌達%楊曉帆%王慧娟%張明順
고뢰%형미분%계효휘%손지체%양효범%왕혜연%장명순
脐血%CD34+HPC%树突状细胞%体外培养
臍血%CD34+HPC%樹突狀細胞%體外培養
제혈%CD34+HPC%수돌상세포%체외배양
目的:优化脐血CD34+造血干细胞(HPC)来源的树突状细胞(DCs)诱导培养方法,为体外研究CD34+HPC诱导产生功能性树突状细胞(DCs)的影响因素奠定基础.方法:淋巴细胞分离液(Ficoll)分离获得脐血单个核细胞,免疫磁珠阳性分选CD34+HPC,并用流式细胞术鉴定CD34+HPC纯度;比较GT(GM-CSF+TNF-α)方案和GTI(GM-CSF+TNF-α+IL-4)方案及GTI方案中TNF-αt和IL-4不同时段加入对诱导培养产生的DCs成熟的影响;通过激光共聚焦显微镜观察细胞形态,流式细胞仪分析细胞表型及3H-TdR检测DCs激发异体T细胞增殖能力.结果:免疫磁珠阳性分选CD34+HPC纯度可达90%以上;将CD34+HPC按GT方案和GTI方案进行培养,均可诱导产生DCs,但经GT方案诱导的DCs CD14表达较高,CD80、CD86、CD83、CD1a表达不如经GTI方案诱导的高;而GTI方案中,以TNF-α0 h加入、IL-4 48 h加入诱导培养的DCs各表型表达相对较佳,并具有激发异体T细胞增殖能力.结论:CD34+HPC经过合适的培养体系能够诱导分化为功能性DCs,以GM-CSF与TNF-α 0h加入、IL-4 48 h加入的GM-CSF+TNF-α+IL-4方案更为可取.
目的:優化臍血CD34+造血榦細胞(HPC)來源的樹突狀細胞(DCs)誘導培養方法,為體外研究CD34+HPC誘導產生功能性樹突狀細胞(DCs)的影響因素奠定基礎.方法:淋巴細胞分離液(Ficoll)分離穫得臍血單箇覈細胞,免疫磁珠暘性分選CD34+HPC,併用流式細胞術鑒定CD34+HPC純度;比較GT(GM-CSF+TNF-α)方案和GTI(GM-CSF+TNF-α+IL-4)方案及GTI方案中TNF-αt和IL-4不同時段加入對誘導培養產生的DCs成熟的影響;通過激光共聚焦顯微鏡觀察細胞形態,流式細胞儀分析細胞錶型及3H-TdR檢測DCs激髮異體T細胞增殖能力.結果:免疫磁珠暘性分選CD34+HPC純度可達90%以上;將CD34+HPC按GT方案和GTI方案進行培養,均可誘導產生DCs,但經GT方案誘導的DCs CD14錶達較高,CD80、CD86、CD83、CD1a錶達不如經GTI方案誘導的高;而GTI方案中,以TNF-α0 h加入、IL-4 48 h加入誘導培養的DCs各錶型錶達相對較佳,併具有激髮異體T細胞增殖能力.結論:CD34+HPC經過閤適的培養體繫能夠誘導分化為功能性DCs,以GM-CSF與TNF-α 0h加入、IL-4 48 h加入的GM-CSF+TNF-α+IL-4方案更為可取.
목적:우화제혈CD34+조혈간세포(HPC)래원적수돌상세포(DCs)유도배양방법,위체외연구CD34+HPC유도산생공능성수돌상세포(DCs)적영향인소전정기출.방법:림파세포분리액(Ficoll)분리획득제혈단개핵세포,면역자주양성분선CD34+HPC,병용류식세포술감정CD34+HPC순도;비교GT(GM-CSF+TNF-α)방안화GTI(GM-CSF+TNF-α+IL-4)방안급GTI방안중TNF-αt화IL-4불동시단가입대유도배양산생적DCs성숙적영향;통과격광공취초현미경관찰세포형태,류식세포의분석세포표형급3H-TdR검측DCs격발이체T세포증식능력.결과:면역자주양성분선CD34+HPC순도가체90%이상;장CD34+HPC안GT방안화GTI방안진행배양,균가유도산생DCs,단경GT방안유도적DCs CD14표체교고,CD80、CD86、CD83、CD1a표체불여경GTI방안유도적고;이GTI방안중,이TNF-α0 h가입、IL-4 48 h가입유도배양적DCs각표형표체상대교가,병구유격발이체T세포증식능력.결론:CD34+HPC경과합괄적배양체계능구유도분화위공능성DCs,이GM-CSF여TNF-α 0h가입、IL-4 48 h가입적GM-CSF+TNF-α+IL-4방안경위가취.
