中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2007年
6期
61-65
,共5页
木霉%几丁质酶%聚丙烯酰胺凝胶电泳%荧光增白剂
木黴%幾丁質酶%聚丙烯酰胺凝膠電泳%熒光增白劑
목매%궤정질매%취병희선알응효전영%형광증백제
为提高木霉几丁质酶检测方法的准确性和灵敏度,建立一种快速检测几丁质酶同工酶的方法.采用活性凝胶电泳、变性凝胶电泳、原位显色凝胶电泳结合荧光增白剂(Calcofluor white M2R)显色从绿色木霉LTR-2发酵产物中检测几丁质酶同工酶.活性凝胶电泳在粗酶液浓缩5倍时显示两条活性谱带,变性凝胶电泳在浓缩10倍时显示一条活性谱带,原位显色凝胶电泳在浓缩20倍时显示两条不清晰的活性谱带,SDS-PAGE显示这两条活性谱带的分子量分别为65kDa和42kDa.结果表明活性聚丙烯酰胺凝胶电泳和Calcofluor white M2R显色相结合的方法在几丁质酶上样量为0.47U时具有较好的分辨能力,是检测木霉几丁质酶同工酶的有效的方法.
為提高木黴幾丁質酶檢測方法的準確性和靈敏度,建立一種快速檢測幾丁質酶同工酶的方法.採用活性凝膠電泳、變性凝膠電泳、原位顯色凝膠電泳結閤熒光增白劑(Calcofluor white M2R)顯色從綠色木黴LTR-2髮酵產物中檢測幾丁質酶同工酶.活性凝膠電泳在粗酶液濃縮5倍時顯示兩條活性譜帶,變性凝膠電泳在濃縮10倍時顯示一條活性譜帶,原位顯色凝膠電泳在濃縮20倍時顯示兩條不清晰的活性譜帶,SDS-PAGE顯示這兩條活性譜帶的分子量分彆為65kDa和42kDa.結果錶明活性聚丙烯酰胺凝膠電泳和Calcofluor white M2R顯色相結閤的方法在幾丁質酶上樣量為0.47U時具有較好的分辨能力,是檢測木黴幾丁質酶同工酶的有效的方法.
위제고목매궤정질매검측방법적준학성화령민도,건립일충쾌속검측궤정질매동공매적방법.채용활성응효전영、변성응효전영、원위현색응효전영결합형광증백제(Calcofluor white M2R)현색종록색목매LTR-2발효산물중검측궤정질매동공매.활성응효전영재조매액농축5배시현시량조활성보대,변성응효전영재농축10배시현시일조활성보대,원위현색응효전영재농축20배시현시량조불청석적활성보대,SDS-PAGE현시저량조활성보대적분자량분별위65kDa화42kDa.결과표명활성취병희선알응효전영화Calcofluor white M2R현색상결합적방법재궤정질매상양량위0.47U시구유교호적분변능력,시검측목매궤정질매동공매적유효적방법.
