光谱学与光谱分析
光譜學與光譜分析
광보학여광보분석
SPECTROSCOPY AND SPECTRAL ANALYSIS
2007年
9期
1775-1779
,共5页
林旭聪%郭良洽%林艳霞%谢增鸿
林旭聰%郭良洽%林豔霞%謝增鴻
림욱총%곽량흡%림염하%사증홍
荧光测定%水溶性花菁染料%蛋白质
熒光測定%水溶性花菁染料%蛋白質
형광측정%수용성화정염료%단백질
基于蛋白质对双嵌花菁染料具有良好的荧光增强作用,以新型水溶性碳菁染1,1'-丙磺酸-3,3,3',3'-四甲基吲哚三次甲基碳菁-5,5'-二磺酸钾为荧光探针,建立了一种新的蛋白质荧光检测体系.实验考察了探针的荧光特征、浓度、缓冲体系pH、盐浓度和乙醇有机试剂等参数对体系荧光的影响.当pH 2.0,花菁染料最大荧光激发波长为548 nm,发射波长为562 nm,血清蛋白与探针作用随着探针浓度的增加而加强,荧光增强值逐渐上升;当探针浓度为1.00×10-6 mol·L-1时,牛血清蛋白BSA和人血清蛋白HSA对花菁探针荧光增强作用最为明显,体系荧光强度与蛋白质浓度成良好的线性关系,BSA和HSA线性响应浓度范围分别为0.20～15.00 μg·mL-1和0.20～12.00 μg·mL-1,检测限(3σ/K)为0.01 μg·mL-1.测定了血清蛋白BSA的合成样品,当BSA浓度为4.00,6.00,8.00 μg·mL-1时,回收率为94.5%～103.3%.
基于蛋白質對雙嵌花菁染料具有良好的熒光增彊作用,以新型水溶性碳菁染1,1'-丙磺痠-3,3,3',3'-四甲基吲哚三次甲基碳菁-5,5'-二磺痠鉀為熒光探針,建立瞭一種新的蛋白質熒光檢測體繫.實驗攷察瞭探針的熒光特徵、濃度、緩遲體繫pH、鹽濃度和乙醇有機試劑等參數對體繫熒光的影響.噹pH 2.0,花菁染料最大熒光激髮波長為548 nm,髮射波長為562 nm,血清蛋白與探針作用隨著探針濃度的增加而加彊,熒光增彊值逐漸上升;噹探針濃度為1.00×10-6 mol·L-1時,牛血清蛋白BSA和人血清蛋白HSA對花菁探針熒光增彊作用最為明顯,體繫熒光彊度與蛋白質濃度成良好的線性關繫,BSA和HSA線性響應濃度範圍分彆為0.20～15.00 μg·mL-1和0.20～12.00 μg·mL-1,檢測限(3σ/K)為0.01 μg·mL-1.測定瞭血清蛋白BSA的閤成樣品,噹BSA濃度為4.00,6.00,8.00 μg·mL-1時,迴收率為94.5%～103.3%.
기우단백질대쌍감화정염료구유량호적형광증강작용,이신형수용성탄정염1,1'-병광산-3,3,3',3'-사갑기신타삼차갑기탄정-5,5'-이광산갑위형광탐침,건립료일충신적단백질형광검측체계.실험고찰료탐침적형광특정、농도、완충체계pH、염농도화을순유궤시제등삼수대체계형광적영향.당pH 2.0,화정염료최대형광격발파장위548 nm,발사파장위562 nm,혈청단백여탐침작용수착탐침농도적증가이가강,형광증강치축점상승;당탐침농도위1.00×10-6 mol·L-1시,우혈청단백BSA화인혈청단백HSA대화정탐침형광증강작용최위명현,체계형광강도여단백질농도성량호적선성관계,BSA화HSA선성향응농도범위분별위0.20～15.00 μg·mL-1화0.20～12.00 μg·mL-1,검측한(3σ/K)위0.01 μg·mL-1.측정료혈청단백BSA적합성양품,당BSA농도위4.00,6.00,8.00 μg·mL-1시,회수솔위94.5%～103.3%.
