现代预防医学
現代預防醫學
현대예방의학
MODERN PREVENTIVE MEDICINE
2007年
24期
4637-4638
,共2页
俞慕华%曾忠铭%段永翔%袁梦%刘楚云%Fang SY
俞慕華%曾忠銘%段永翔%袁夢%劉楚雲%Fang SY
유모화%증충명%단영상%원몽%류초운%Fang SY
Fab抗体%噬菌体%可变区基因%腮腺炎病毒
Fab抗體%噬菌體%可變區基因%腮腺炎病毒
Fab항체%서균체%가변구기인%시선염병독
[目的]获得抗腮腺炎病毒Fab段基因工程抗体.[方法]将腮腺炎病毒抗原(MUV-Ag)包被在固相ELISA板中,采用"吸附-洗脱-扩增"的方法,对已构建的抗腮腺炎病毒噬菌体抗体库进行富集.从富集后的抗体中筛选抗腮腺炎病毒阳性克隆,并交叉筛选鉴定其特异性.[结果]在对176个克隆筛选后,再用麻疹病毒抗原(MEV-Ag)、混合副流感病毒抗原(mPIV-Ag)和呼吸道合胞病毒抗原(RSV-Ag)进行交叉筛选,最终获得特异性抗MUV-Ag阳性克隆2个(B206和D210).对其中1株B206序列分析表明它的к轻链V基因属于VкⅠ(O12)亚群,J基因属于Jκ1;γ链V基因属于VH1-69 亚群,D基因来自D3-10,J基因则来自JH6.[结论]用腮腺炎病毒抗原成功地从抗体库中筛选到特异性阳性克隆,构建的噬菌体抗体库是有效的.
[目的]穫得抗腮腺炎病毒Fab段基因工程抗體.[方法]將腮腺炎病毒抗原(MUV-Ag)包被在固相ELISA闆中,採用"吸附-洗脫-擴增"的方法,對已構建的抗腮腺炎病毒噬菌體抗體庫進行富集.從富集後的抗體中篩選抗腮腺炎病毒暘性剋隆,併交扠篩選鑒定其特異性.[結果]在對176箇剋隆篩選後,再用痳疹病毒抗原(MEV-Ag)、混閤副流感病毒抗原(mPIV-Ag)和呼吸道閤胞病毒抗原(RSV-Ag)進行交扠篩選,最終穫得特異性抗MUV-Ag暘性剋隆2箇(B206和D210).對其中1株B206序列分析錶明它的к輕鏈V基因屬于VкⅠ(O12)亞群,J基因屬于Jκ1;γ鏈V基因屬于VH1-69 亞群,D基因來自D3-10,J基因則來自JH6.[結論]用腮腺炎病毒抗原成功地從抗體庫中篩選到特異性暘性剋隆,構建的噬菌體抗體庫是有效的.
[목적]획득항시선염병독Fab단기인공정항체.[방법]장시선염병독항원(MUV-Ag)포피재고상ELISA판중,채용"흡부-세탈-확증"적방법,대이구건적항시선염병독서균체항체고진행부집.종부집후적항체중사선항시선염병독양성극륭,병교차사선감정기특이성.[결과]재대176개극륭사선후,재용마진병독항원(MEV-Ag)、혼합부류감병독항원(mPIV-Ag)화호흡도합포병독항원(RSV-Ag)진행교차사선,최종획득특이성항MUV-Ag양성극륭2개(B206화D210).대기중1주B206서렬분석표명타적к경련V기인속우VкⅠ(O12)아군,J기인속우Jκ1;γ련V기인속우VH1-69 아군,D기인래자D3-10,J기인칙래자JH6.[결론]용시선염병독항원성공지종항체고중사선도특이성양성극륭,구건적서균체항체고시유효적.
